巨噬细胞是一类具有高度异质性的细胞,生理状态下的巨噬细胞很容易被激活,因此机体普遍存在不同亚群的巨噬细胞。经典激活的巨噬细胞（M1）可分泌促炎因子和活性氧,并且可以迁移到炎症部位,成为宿主防御的一部分;替代激活的巨噬细胞（M2）则可通过产生抗炎细胞因子和吞噬凋亡细胞而在免疫稳态中发挥作用。既往的研究证实成骨细胞和破骨细胞在骨改建过程中发挥着重要的作用,但随着对骨改建相关研究的深入,学者们发现免疫系统在骨改建过程中也扮演着重要的角色,因此,巨噬细胞作为免疫系统的重要组成细胞之一,在骨改建过程中所发挥的作用也不容忽视。目的通过体外培养大鼠骨髓巨噬细胞（Bone Marrow-Derived Macrophages,BMMs）,比较未激活、IFN-γ和LPS激活以及IL-4激活的BMMs生物学行为的差异。在这一部分实验的基础上,通过体外培养大鼠颌骨成骨细胞（Mandible Osteoblasts,MOBs）,采用MOBs条件培养基刺激BMMs,初步探讨MOBs对BMMs生物学行为的影响。方法1.通过原代细胞形态学观察、瑞氏染色和流式细胞术对体外分离培养的大鼠BMMs进行细胞鉴定。2.经IFN-γ和LPS、IL-4分别诱导激活24h后,通过倒置显微镜进行细胞形态学观察,Realtime-PCR检测细胞表面标记物Nos2和Arg1的表达,CCK8法进行增殖能力测定,流式细胞术进行凋亡水平检测,中性红染色鉴定细胞吞噬功能。3.通过原代细胞形态学观察,成骨诱导后ALP和茜素红染色,流式细胞术对体外分离培养的大鼠MOBs进行细胞鉴定。4.采用MOB条件培养基（MOB-CM）刺激BMMs 24h后,CCK8法进行增殖能力测定,流式细胞术进行凋亡水平检测,中性红染色鉴定细胞吞噬功能,Realtime-PCR检测细胞表面标记物Nos2和Mrc1、促炎性细胞因子Il1b、Il6和Tnfa、抑炎性因子Arg1、Il10和Tgfb的表达,以及破骨分化相关基因Ctsk、Trap、Nfkb1和Nfatc1的表达。结果1.经IFN-γ和LPS联合刺激的BMMs高表达M1型细胞表面标记物Nos2,可略微促进细胞凋亡并且降低细胞的吞噬功能;而经IL-4刺激的BMMs则高表达M2型细胞表面标记物Arg1,并促进细胞的增殖和吞噬能力、显著抑制细胞的凋亡。2.MOB-CM可抑制BMMs的凋亡,明显增强细胞的吞噬功能,略微增加M1型巨噬细胞表面标记物Nos2的表达。上调抑炎因子Il10的表达,对促炎因子Il6、Tnfa和抑制因子Arg1的表达有下调作用。对破骨细胞分化相关基因Ctsk、Trap和Nfatc1的表达也有不同程度的下调。结论1.不同诱导极化方式可影响BMMs的生物学行为。2.MOB-CM对BMMs表面标记物的表达以及促炎、抑炎因子和破骨细胞分化相关因子基因的表达有一定的作用。