【摘 要】
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目的:虎杖苷是从我国中药虎杖根茎中提取的芪类化合物,是葡萄糖与白藜芦醇的结合物,其作为一种植物多酚类药物,具有强大的抗炎、抗氧化应激、抗凋亡、保护线粒体功能等药理学
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目的:虎杖苷是从我国中药虎杖根茎中提取的芪类化合物,是葡萄糖与白藜芦醇的结合物,其作为一种植物多酚类药物,具有强大的抗炎、抗氧化应激、抗凋亡、保护线粒体功能等药理学作用。近年来随着对溃疡性结肠炎(UC)治疗研究的不断深入,调节肠道炎性反应、氧化应激以及维持肠黏膜屏障的完整性成为了治疗UC的有效靶点。本文运用葡聚糖硫酸钠(DSS)在小鼠中建立急性结肠炎模型,并探讨虎杖苷对小鼠急性结肠炎的干预作用及其机制,旨在为临床UC的预防和治疗提供新的理论基础。方法:随机将50只C57BL/6小鼠分为5组:空白对照组、DSS模型组、15mg/kg剂量组(DSS+15mg/kg虎杖苷)、30mg/kg剂量组(DSS+30mg/kg虎杖苷)、45mg/kg剂量组(DSS+45mg/kg虎杖苷),每组10只。小鼠自由饮用3%DSS溶液连续7天建立急性结肠炎模型,并于造模第一天开始给予3种不同浓度虎杖苷干预,连续7天。每天检测各组小鼠结肠炎疾病活动指数(DAI),包括体重变化、粪便性状和隐血情况以及小鼠活动状态。实验结束后测量各组小鼠结肠长度;评价小鼠结肠组织HE染色病理损伤变化;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达水平;生化检测氧化应激指标MDA、SOD和GSH-Px水平;免疫印迹(Western blot)检测小鼠结肠组织中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase 3和Shh信号通路(包括Shh,Smo,Ptc及Gli1)的蛋白表达水平。结果:与DSS模型组相比,虎杖苷各剂量组DAI评分降低(P<0.05);30mg/kg和45mg/kg虎杖苷剂量组能够不同程度抑制小鼠结肠的缩短(P<0.05);结肠组织HE染色显示,虎杖苷各剂量组结肠组织微观病变程度明显减轻(P<0.05)。DSS模型组小鼠结肠组织中的TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显增加,30mg/kg和45mg/kg虎杖苷干预后,三种炎症因子水平明显降低(P<0.05)。与DSS模型组相比,虎杖苷各剂量组MDA含量降低(P<0.05),同时三组小鼠结肠组织GSHPx活力值升高(P<0.05),抗氧化酶SOD经30mg/kg和45mg/kg虎杖苷干预后其活力水平明显升高(P<0.05)。虎杖苷能够降低结肠组织细胞凋亡,与DSS模型组相比,经虎杖苷干预后结肠组织中促凋亡蛋白Bax水平降低(P<0.05),30mg/kg和45mg/kg虎杖苷能够同时降低cleaved-caspase 3水平(P<0.05)并升高抗凋亡蛋白Bcl-2水平(P<0.05)。检测小鼠结肠组织中Shh信号通路的改变发现,与DSS模型组相比,30mg/kg和45mg/kg虎杖苷能够激活结肠组织中的Shh信号通路,该通路组成Shh、Smo、Ptc和Gli1蛋白表达增加(P<0.05)。结论:虎杖苷能够缓解小鼠急性结肠炎症状,改善小鼠体重下降、结肠缩短及结肠组织损伤的程度,对小鼠急性结肠炎具有良好的保护作用。虎杖苷明显抑制了结肠组织中炎症因子的表达;同时增加结肠组织中抗氧化酶活力值并降低MDA水平;经虎杖苷干预后结肠组织中细胞凋亡降低。虎杖苷在小鼠急性结肠炎中的抗炎、抗氧化及抗凋亡作用部分是通过激活结肠组织中的Shh信号通路实现的。
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