青钱柳多糖结构、抗氧化及对高脂饮食小鼠全基因组DNA甲基化的影响

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多糖是青钱柳中最重要的功能性成分之一。为了探究青钱柳多糖对高脂饮食小鼠抗氧化和全基因组DNA甲基化的影响,本研究使用DEAE对青钱柳粗多糖进行分离纯化,得到纯化后的青钱柳多糖(CPP-Ⅱ)。采用傅里叶变换红外光谱(Fourier transform-infrared pectroscopy,FT-IR)、高效凝胶渗透射谱(High performance liquid gel permeation chromatography,HPGPC)、气相色谱(Gas chromatography,GC)和扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM)对CPP-Ⅱ的结构进行分析;将ICR(Institute of Cancer Research,美国癌症研究所)小鼠分为空白对照组、模型对照组、CPP-Ⅱ低、中、高剂量组和阳性对照组,分别灌胃蒸馏水15 ml/kg·BW/d、高脂乳剂(high-fat emulsion,HFE)15 ml/kg·BW/d、CPP-Ⅱ水溶液150、300、600 mg/kg·BW/d和辛伐他汀水溶液5 mg/kg·BW/d,连续喂养28 d。实验结束后,观测CPP-Ⅱ对小鼠血清和肝脏中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglycerides,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平及抗氧化酶活性的影响;使用全基因组DNA甲基化法来探索CPP-Ⅱ对高脂饮食小鼠脂代谢的分子机理。实验结果表明:(1)CPP-Ⅱ为多糖聚合物,重均分子量(Mw)为307 kDa和3.7 kDa;CPP-Ⅱ由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖这4种单糖构成,其摩尔比为1.00:0.78:3.22:0.45。(2)CPP-Ⅱ能够明显减少高脂饮食小鼠血清和肝脏中TC、TG和LDL-C的含量,同时提高HDL-C含量(P<0.01或P<0.05)。(3)CPP-Ⅱ能够提升高脂饮食小鼠血清和肝脏中谷氨酸丙酮酸转氨酶(Glutamate pyruvate transaminase,GPT)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)等酶的活性,并降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)含量,增强总抗氧化能力(Total antioxidant capability,T-AOC)水平(P<0.01或P<0.05)。(4)CPP-Ⅱ能降低高脂饮食小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化的水平,并且通过调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路、脂肪酸代谢通路、脂肪酸生物合成通路和脂肪细胞因子信号等通路,从而起到降脂作用。
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