补肾益髓埋线法治疗绝经后骨质疏松大鼠的肠钙机制研究

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绝经后骨质疏松症(postmenopausa osteoporosis, PMOP)是多病因疾病,以绝经后出现骨转换加速、骨量降低、骨组织微细结构被破坏、骨脆性和骨折危险性增加为特征。随着社会的老龄化,患病的人逐渐增加,已引起广泛关注。因此,对PMOP的研究是当今社会的的热门课题,也是医学界的新研究目标。而在各项研究中表明:针灸类医学在该病防治方面具有巨大优势,是防止PMOP的理想手段。为了能给进一步的科研与治疗提供参考依据和思路,此研究围绕绝经后骨质疏松的病理及代谢变化进行指标检测,以明确穴位埋线治疗该病的机理,以及施治周期对埋线效果的影响。目的:利用穴位埋线治疗绝经后骨质疏松症模型大鼠,通过检测骨代谢过程中各项具有说明意义的指标,检验补肾益髓埋线法对绝经后骨质疏松症治疗是否有效,并探究穴位埋线治疗PMOP的内在调节机制,比较其与雌激素替代疗法的效应及机理异同。同时,观察施治周期与各指标改善情况的关系,以期能证明补肾益髓埋线法是治疗绝经后骨质疏松症的理想选择。方法:查找文献以探究绝经后骨质疏松症的发病机制及研究进展,搜集补肾益髓埋线法治疗PMOP的理论依据,确定治疗方案。选择摘除双侧卵巢的雌性SD大鼠正常饲养3月,为绝经后骨质疏松病理模型。将去势成功的更年期病理模型大鼠50只,随机分为,5组:5天埋线组(A组)10只、10天埋线组(B组)10只、15天埋线组(C组)、雌激素对照组(D组)10只,空白模型组(E组)10只,另外再设假手术组(F组)10只作对照。埋线组取穴:“肾俞”、“绝骨”、“三阴交”、“关元”“大杼”,其中“肾俞”、“三阴交”及“绝骨”每次埋线选择单侧穴位,下一次埋线选择对侧穴位交替进行;雌激素对照组用已烯雌酚加蒸馏水配成浓度为4.5mg/L溶液,按5ml/kg,1次/天量灌胃;空白模型组及假手术组用生理盐水等剂量、等频率灌胃。全部治疗90天。疗程结束后,所有实验动物均在末次治疗后第5天处死。观察并比较以下指标:(1)各组大鼠左侧股骨骨密度(BMD);(2)十二指肠粘膜转钙蛋白(CaBP-D9k)及维生素D受体(VDR)mRNA表达量;(3)雌二醇(E2)、血清钙、磷、降钙素(CT)及碱性磷酸酶(ALP)血清水平。结果:模型大鼠经治疗后,骨密度均有不同程度提高,表明埋线各组治疗及雌激素治疗均可抑制骨吸收,防止骨质进一步丢失;其中,5天埋线组(A组)及雌激素对照组能明显纠正PMOP骨量的下降(与较模型组对比P<0.05),并且二者效应相近或相似(两组间P>0.05)。各埋线组间骨量提升区别不明显(P>0.05),但有随着埋线周期延长而下降的趋势。十二指肠VDR mRNA量空白模型组与假手术组极为接近(比率极近于1),故以下对比皆以空白模型组为参照:5天埋线治疗可以显著的增强去卵巢后VDR mRNA的转录(比率>1),而埋线周期过长(10天、15天)不会增强VDR表达,反而会有抑制效果,而雌激素治疗也会明显抑制VDR的表达量(各组比率<1)。对于CaBP mRNA,以假手术组为参照,空白模型组CaBP mRNA的转录明显减少(比率<1);相比于空白模型组,埋线及雌激素替代均会在去卵巢后抑带(?)CaBP的表达(各组比率<1),其中雌激素抑制效果最明显;与雌激素治疗组相比,3个埋线组都显示有更多的CaBP mRNA转录,按量从低到高依次为5天埋线、10天埋线、15天埋线,提示CaBP mRNA的转录量随着埋线频率升高而降低,即埋线频率与对CaBP表达量呈负相关。血清E2在治疗后提高显著,但效应有随着埋线周期延长而下降的趋势,其中5天埋线组及雌激素治疗组升高显著(P<0.05),且两组间差异不明显(P>0.05),各埋线组间改变无显著性差异(P>0.05)。而去势后大鼠血清Ca、P及CT含量都明显下降(P<0.05),雌激素治疗有明显的升血Ca和血P的作用(P<0.05),并且能促进CT的分泌入血。A、B、C三埋线组均表现出类似治疗作用,其中5天埋线与雌激素疗法升Ca、P的程度无明显差异(P<0.05)。CT的含量在模型组为显著下降,但不论是埋线还是雌激素替代都不能良好的纠正,有过度升高的作用,但较正常值升高量并不显著(P>0.05);四个治疗组间的效应差异不明显(P<0.05)结论:在本动物实验中,补肾益髓埋线法对绝经后骨质疏松大鼠的骨量提高有确切效果,其效应在宏观上呈现随着施治周期减短而增强的趋势,其中,5天埋线效果最好,与雌激素替代治疗法相近。而该法治疗PMOP的机理可能跟调节内分泌有关,依靠升高血清E2,从发病基础上纠正病因,有类雌激素样作用;在骨质及钙代谢方面,整体上并不能上调十二指肠粘膜VDR及CaBP-D9k的表达,于肠钙吸收调节的促进作用并不明显,甚至有一定的抑制作用;结合血清钙磷水平及骨密度的改善,考虑骨量的增加来源于骨钙排泄的减少。此外,补肾益髓埋线法较雌激素替代副作用少,施治方便安全,可能为绝经后骨质疏松症的防治提供有价值的研究线索及理论依据。
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