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朊病毒病也称为传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathies, TSEs),是由淀粉样纤维聚集所致。它的病理学典型特征是大脑空泡化,神经元发生死亡以及小胶质细胞的激活。朊病毒疾病在人类疾病中包括库鲁病、克雅氏病(CJD)、致死性家族性失眠症(FFI)以及格-史氏综合症,在动物疾病中包括牛海绵状脑病和绵羊山羊瘙痒症。该疾病的发病机制主要是由于在机体内细胞中的正常朊蛋白(PrPc)发生蛋白的错误折叠(PrPSc)而引起的,这些错误折叠的朊蛋白的相互聚集是引起该疾病发生的主要影响因子。另一方面,人类的阿尔兹海默病人的海马区内以及阿尔兹海默病的鼠模型中,氧化应激诱导c-Abl/p73通路参与到神经退行性疾病当中。还有研究表明,在朊病毒感染的细胞模型中,利用酪氨酸抑制剂特异性的抑制c-Abl蛋白可以提高PrPsc的清除,而且不影响正常的PrPC的生物合成,定位以及朊蛋白的生化特性。我们研究的目的是寻求对神经退行性疾病过程中的氧化应激作用与地位的正确解释,进一步探讨prion疾病的发病机理,研究内容如下：1.本研究构建了MST1、Foxo3、Bax和BIM基因的SYBR Green I实时荧光定量PCR标准品质粒和标准曲线,通过该方法的建立获得这四种基因SYBR Green I实时荧光定量PCR标准曲线方程,为下一步的定量检测工作奠定了良好的实验基础。2.本研究利用PrP106-126多肽的神经毒性对细胞氧化应激可能的诱导作用,建立细胞的氧化应激模型,利用siRNA干扰技术降低c-Abl蛋白的表达可以抑制神经元凋亡通路,并发现c-Abl酪氨酸激酶作为MST1和BIM蛋白的上游调节子在prion疾病中起到了重要的作用。3.利用上述模型进一步表明,抑制c-Abl蛋白的表达降低了PrP106-126诱导的细胞线粒体功能的失衡,ROS的产生以及Bax蛋白向线粒体的移位和细胞色素C蛋白向细胞浆内释放,进而降低caspase9和caspase3的激活。通过电镜可以发现,降低c-Abl蛋白的表达,可以减少PrP106-126诱导的神经元形态学发生的改变。综上所述,本研究表明c-Abl酪氨酸激酶参与了神经毒性多肽通过调节线粒体平衡从而诱导神经元的凋亡,并证明该蛋白可能是治疗朊病毒的潜在治疗靶点。