【摘 要】
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黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)是曲霉属真菌产生的一种次级代谢产物,是目前所发现的毒性最强的真菌毒素之一,属于I级致癌物质。黄曲霉毒素B1广泛存在于玉米、花生等农作物中,对人畜具有致畸、致癌、致突变等作用。黄曲霉也是平菇栽培过程的一种重要病原真菌,会引起平菇产量及品质的下降。本研究旨在筛选出漆酶活性高、对黄曲霉具有较强抗性的平菇菌株,并对其降解黄曲霉毒素B1的效果进行研究,为平菇的绿色安
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黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)是曲霉属真菌产生的一种次级代谢产物,是目前所发现的毒性最强的真菌毒素之一,属于I级致癌物质。黄曲霉毒素B1广泛存在于玉米、花生等农作物中,对人畜具有致畸、致癌、致突变等作用。黄曲霉也是平菇栽培过程的一种重要病原真菌,会引起平菇产量及品质的下降。本研究旨在筛选出漆酶活性高、对黄曲霉具有较强抗性的平菇菌株,并对其降解黄曲霉毒素B1的效果进行研究,为平菇的绿色安全生产以及农产品中黄曲霉毒素的处理提供理论依据。主要研究结果如下:1.采用愈创木酚、单宁酸和ABTS选择培养基对平菇漆酶进行初步筛选,根据据氧化圈/菌丝圈大小和颜色变化等特征,从24株平菇菌株中初步筛选得到8株漆酶活力较高的菌株,将初筛获得菌株进行液体发酵培养,测定发酵液的漆酶活性,复筛得到2株漆酶活性最强菌株P6和P20。2.选用平菇漆酶高产菌株P6和P20发酵液对AFB1进行降解,P6和P20菌株初发酵液对AFB1的降解率分别为86.4%和72.12%。P6菌株发酵液添加Cu2+和表面活性剂Triton X-100后,其对AFB1的降解率分别提高到90.43%和92.88%,吐温20对平菇发酵液降解黄曲霉毒素B1具有一定的抑制作用。平菇漆酶活力与黄曲霉毒素B1的降解率呈现一定的正相关性,即酶的活性越高,降解毒素的能力越强。3.从玉米、花生地土样中分离曲霉菌株,经进行形态学和分子生物学鉴定,有10个菌株被鉴定为黄曲霉。采用菌落显色法对菌株产毒情况进行鉴别,发现菌株AF02和AF03不产生黄曲霉毒素,其余8株均产生毒素。在YES培养基上培养产毒菌株后,经HPLC检测,发现1个菌株即AF13能同时产生4种黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,另外7株只产生AFB1和AFB2,而以菌株AF08产生的黄曲霉毒素AFB1量最高,为3.553μg/g。4.以产黄曲霉毒素AFB1最高的菌株AF08为靶标,进行曲霉抗性平菇菌株筛选,不同菌株对黄曲霉的拮抗能力差异显著,P3、P5、P6、P17、P18、P19、P21、P23对黄曲霉无抗性,共培养10d后黄曲霉菌丝即覆盖平菇菌丝生长,且产生大量的孢子。而P2、P4、P9、P15、P16、P20共培养40d,则可完全覆盖曲霉菌丝生长,表现出对黄曲霉的强抗性。
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