人参皂苷Rb3的分离及其抗糖尿病和调脂活性研究

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西洋参(Panax quinquefolium L.)为五加科(Araliaceae)人参属植物,又称花旗参,原产于美国东部、北美洲加拿大的蒙特利尔和魁北克以及法国,近年来在我国东北及北京、西安、江西、山东等地大量引种。西洋参在我国的使用已有200多年的历史,因其具有补气养阴、清热生津的功效而倍受青睐。西洋参的主要药理活性成分是人参皂苷。研究表明西洋参叶中的总皂苷含量高于主根、须根等其它部分,且西洋参叶中原人参二醇型皂苷(Protopanaxadiol,简称PPD)含量高于原人参三醇型皂苷(Protopanaxatriol,简称PPT)含量。可见,西洋参叶具有很高的开发利用价值,对其合理利用还可减少资源的浪费。西洋参茎叶皂苷的药理活性包括抗衰老、增强免疫力、促进造血功能、保护局灶性脑缺血损伤、抗心肌缺血以及降血糖、改善糖耐量等,西洋参茎叶二醇组皂苷还具有调节血脂的活性。人参皂苷Rb3是西洋参叶中人参二醇组皂苷的主要成分之一。现有的文献对人参皂苷Rb3在心脑血管疾病上的应用报道相对较多,如保护神经系统及缺血低氧性脑损伤、抗血栓以及修复心肌损伤等。然而,人参皂苷Rb3在控制血糖和调节血脂方面还尚未见报道。本试验在前人研究的基础上考察了人参皂苷Rb3对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠空腹血糖、糖耐量、饮食饮水的影响以及对试验性血脂异常小鼠口服葡萄糖耐量和血脂的影响,旨在为人参单体皂苷在糖尿病、血脂异常等疾病中的应用提供一定的理论依据。首先利用NKA-12大孔树脂经不同浓度乙醇洗脱,从西洋参茎叶粗提物中分离PPD和PPT。结果表明30%乙醇洗脱部分为PPT,50%乙醇洗脱部分为PPD。PPT和PPD重量分别为42.5 g和111.2 g。然后利用氯仿-甲醇-水(65:35:10)和正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5)两种溶剂系统,反复硅胶干柱层析的方法从PPD中共分得人参单体皂苷Rb310.5 g,得率为5.25%,经HPLC检测,其纯度为93.87%。本试验以四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠,观察人参皂苷Rb3对其影响。结果人参皂苷Rb3能够降低四氧嘧啶型糖尿病小鼠的空腹血糖,改善其口服葡萄耐量,降低其饮食量和饮水量,并对胰岛组织的损伤有一定的修复作用,证明了人参皂苷Rb3具有一定的抗糖尿病活性。因此,人参皂苷Rb3在改善糖尿病症状以及预防因血糖和糖耐量异常而引起的心血管疾病中存在一定的潜在应用价值。本试验还研究了人参皂苷Rb3对C2C12细胞葡萄糖摄取的影响,结果100 uM和200uM的人参皂苷Rb3能够增强C2C12骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取,但作用低于100 nM的胰岛素的作用。本试验证明了人参皂苷Rb3对C2C12骨骼肌细胞的葡萄糖摄取有一定的增强作用,因此,人参皂昔Rb3在增强胰岛素敏感性方面可能会有一定的应用价值。本试验以高脂饲料诱导诱导小鼠血脂异常,观察人参皂苷Rb3对血脂异常小鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C及LDL-C/HDL-C等血脂指数及口服葡萄糖耐量的影响,结果人参皂苷Rb3能够降低血脂异常小鼠TG、TC、LDL-C及LDL-C/HDL-C,并降低糖尿病小鼠口服糖耐量试验中血糖-时间曲线下面积。证明了人参皂苷Rb3具有一定的调节血脂及改善血脂异常小鼠口服糖耐量的活性,为其在防治血脂异常引起的动脉粥样硬化、冠心病、高血压等疾病的应用提供一定的理论依据。
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