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背景与目的： 食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其中50％以上的新发病例发生在我国，目前我国已是全球食管癌发病率和死亡率最高的国家，且患者的5年生存率不到10%。肿瘤的发生常伴随着DNA损伤，其中双链损伤是最严重的类型之一，目前γ-H2AX被看作是DNA双链损伤一个标志性的蛋白，且在双链损伤修复过程当中起到重要的连接作用，参与启动DNA修复反应。此外肿瘤也被认为是一种细胞周期疾病，细胞生长周期的失调与肿瘤的发生发展有直接关系。CyclinDl为G1期细胞周期素，其表达一旦失控，将会引起细胞增殖周期失调，从而引起肿瘤的发生。PCNA在G1期开始增加，至S期达到高峰，参与DNA的合成并在细胞周期中起重要的调控作用。CyclinB1是控制细胞进入G2/M期的关键因子，在G2晚期达到峰值。人类肿瘤中存在DNA损伤已经被证实，但至今关于DNA双链损伤与细胞周期之间关系的研究甚少。本课题主要研究γ-H2AX与细胞周期蛋白（CyclinD1、PCNA、CyclinB1）之间的关系，探讨它们在食管癌发生发展中的作用，为更好地指导临床诊断与治疗预后提供理论与实验依据。 材料和方法： 1.实验标本86例无放化疗史的食管癌组织标本，12例上皮内瘤变组织标本、39例远端正常粘膜组织标本。并整理86例患者临床相关病理资料和34例患者随访情况资料。 2. HE染色观察食管癌、上皮内瘤变及远端正常粘膜标本的组织学形态。 3.免疫组织化学染色应用Envision两步法分别检测γ-H2AX、CyclinD1、PCNA和CyclinB1在食管组织中的表达。 4.细胞免疫荧光染色检测食管癌细胞系EC1中γ-H2AX与CyclinB1的共表达情况。 5.图像分析法用Leica IM50图像采集系统和Image-Pro Plus6.0图像分析系统对染色结果进行分析。 6.统计分析应用SPSS19.0统计软件对数据进行统计学分析，采用卡方检验统计分析它们的阳性表达与食管癌各临床病理特征的关系，Kaplan-Meier法比较组间生存时间的差别，生存时间比较采用Log-rank test。P<0.05认为有统计学意义，P<0.01有高度统计学意义。 结果： 1.食管癌组γ-H2AX的阳性表达率为68.6%（59/86），稍高于EIN组的阳性表达率66.7%（8/12），且两者明显高于远端粘膜组12.8%（5/39），三者比较差异有统计学意义（P<0.01）。食管癌组CyclinB1的阳性表达率为74.4%（64/86），高于EIN组的阳性表达率66.7%（8/12）及远端粘膜组35.9%（14/39），三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。 2.γ-H2AX蛋白表达减少与食管癌的TNM分期、淋巴结转移有关（P<0.05）；CyclinD1、PCNA蛋白表达的增强与食管癌TNM分期、淋巴结转移显著相关（P<0.05）；CyclinB1蛋白的表达与临床各病理参数均无明显相关。 3.在食管癌组织中，γ-H2AX的表达与CyclinB1的表达之间呈正相关性(r=0.235，P=0.029)，γ-H2AX的表达与CyclinD1及PCNA的表达之间无明显相关关系。 4. Kaplan-Meier生存分析发现，单独检测γ-H2AX、CyclinD1、PCNA及CyclinB1等蛋白的表达情况对食管癌患者的生存率的影响无统计学意义；但联合检测γ-H2AX、CyclinB1蛋白阳性表达组的生存率高于阴性表达组，其差别具有统计学意义（Log-rank test, P=0.038）。 结论： 1.γ-H2AX、CyclinB1在远端粘膜组、EIN组、食管癌组中的表达呈逐步升高，说明它们可能在食管癌的发生发展过程中起重要作用。 2.γ-H2AX与CyclinB1在食管癌组织共表达可能正面影响病人预后，为食管癌的预后评估提供新的参考。