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目的建立测定胃蛋白酶含量的方法：双抗体夹心生物素-链亲和素化学发光酶免疫分析法；应用此方法对临床标本进行检测,探讨其临床应用价值。方法本实验以双抗体夹心法原理为基础,采用兔抗人胃蛋白酶抗体包被固相发光微孔板,结合生物素-链亲和素系统,用生物素标记胃蛋白酶抗体,链亲和素偶联辣根过氧化物酶,应用化学发光酶免疫分析技术,建立测定胃蛋白酶含量的方法。通过化学发光免疫实验方法,优化该方法检测胃蛋白酶含量的实验条件,评价该方法的灵敏度、特异度、精确度。收集不同胃部疾病患者的胃液,包括正常组21例,胃癌组5例,浅表性胃炎组44例,胃溃疡组13例,反流性食管炎组15例,十二指肠溃疡组15例；应用双抗体夹心生物素-链亲和素化学发光酶免疫分析法测定其胃蛋白酶含量,观察不同类型胃部疾病,胃液pH值、性别和年龄对胃液胃蛋白酶含量的影响。结果通过优化此方法,得到最佳实验条件：胃蛋白酶抗体最适包被浓度为5μg/ml,生物素抗体最适稀释比为1：500,37℃下第一步温育60min、第二步30mmin、第三步30min,化学发光底物反应时间为5min。评价此方法线性范围：2-200ng/ml,线性相关性r>0.99,灵敏度为0.3ng/mL,与溶菌酶、唾液淀粉酶、胃蛋白酶原和胃蛋白酶原II的交叉率均小于0.5%,批内变异系数<7%,批间变异系数<10%。测定113例不同胃部疾病患者胃液中胃蛋白酶含量,数据通过SPSS17.0进行统计分析结果显示：溃疡组和胃癌组较正常组有统计学差异,溃疡组的胃蛋白酶含量高于正常组,胃癌组的胃蛋白酶含量低于正常组,浅表性胃炎组和反流性食管炎组较正常组无显著性差异；胃液的pH值越低胃蛋白酶的含量越高,男性和女性之间胃液胃蛋白酶含量及不同年龄组间胃液胃蛋白酶含量无显著性差异。结论建立的双抗体夹心生物素-链亲和素化学发光酶免疫分析方法测定胃蛋白酶含量具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点,可在临床上广泛应用。不同胃液中胃蛋白酶含量主要与患者的疾病类型及胃液pH有关,与患者的性别及年龄无关。