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蜡蚧轮枝菌是一种重要的昆虫病原真菌,主要寄主是蚜虫、白粉虱等。对该菌常温储藏方法的研究有助于其商品化生产。本文首先对蜡蚧轮枝菌分生孢子的干燥工艺进行了初步探讨,之后研究了温度、含水量、载体和采收时间等对蜡蚧轮枝菌分生孢子储藏期活力的影响,从而优化了该菌的常温储藏方法;并且研究了营养对蜡蚧轮枝菌分生孢子萌发率以及对温室白粉虱致病力的影响。主要结论如下:
1、采用低真空常温干燥法和真空冷冻干燥法对蜡蚧轮枝菌分生孢子进行了干燥处理,结果表明干燥方法、干燥温度和干燥时间对分生孢子的萌发率和致病力都有一定影响。真空冷冻干燥更适合用来控制蜡蚧轮枝菌分生孢子的含水量。干燥24h以后,其含水量可以达到5.4%,显著低于对照孢子粉;16h萌发率为90.3%,同时对温室白粉虱若虫的致病力(1×108孢子/mL)达到94.7%,与新鲜分生孢子的萌发率和致病力没有显著差异(P>0.05)。但从经济角度来看,低真空30℃干燥更具有应用前景,干燥12h以后分生孢子的含水量为13.8%,萌发率为85.7%,对温室白粉虱若虫的致病力也高达93.3%,所以在此基础上加入干燥剂或采取一些其它措施,可以进一步优化分生孢子的干燥工艺。
2、温度是影响蜡蚧轮枝菌分生孢子储藏稳定性的一个十分关键的因素。保存6个月后,在所有供试载体中,孢子萌发率随储藏温度的升高逐渐降低,并且存在着显著的差异性(P<0.05)。如凹凸棒粘土和分生孢子混合后在15℃储藏半年,孢子萌发率为65.9%,25℃为48.7%,35℃储藏后萌发率仅为4.0%。温度同时也影响分生孢子的致病力,随着储藏温度的提高,分生孢子致病力也显著降低(P<0.05)。
3、载体对分生孢子储藏稳定性也有重要的影响作用。凹凸棒粘土和活性炭比较适合用来做蜡蚧轮枝菌分生孢子的保存载体,25℃储藏6个月以后,凹凸棒粘土和活性炭处理的分生孢子萌发率分别为48.7%和54.0%,而纯孢子则为10.3%,显著提高了孢子活力(P<0.05)。分生孢子在花生油中的保存效果远远低于固体载体中,25℃保存半年后孢子在油中的几个处理萌发率分别为9.3%、5.2%和1.6%,显著低于上述提到的两种载体处理(P<0.05)。
4、含水量也是影响蜡蚧轮枝菌分生孢子常温储藏寿命的一个因素。在供试的几种载体中,干燥的分生孢子(含水量约为5.4%)在不同温度下储藏半年以后萌发率都高于没有进行干燥工艺的分生孢子(含水量约为19.2%)。其中干燥的纯孢子15℃保存6个月以后萌发率为39.6%,而不干燥的则为25.1%,二者具有显著差异(P<0.05);25℃保存半年后干燥的纯孢子和没有干燥的纯孢子萌发率分别为24.6%和20.2%,二者差异不显著(P>0.05)。
5、采收时间对分生孢子的储藏稳定性期也有一定影响。25℃保存的分生孢子,除了个别处理孢子几乎不萌发,15d采收的孢子萌发率明显高于20d(P<0.05)。从对温室白粉虱的致病力看,低浓度(1×106孢子/mL)15℃和25℃保存时大米培养基上生长15d后采收的分生孢子致病力要高于20d,而在35℃保存半年以后,20d的分生孢子致病力则高于15d。
6、营养对PDA和大米培养基上采收的蜡蚧轮枝菌分生孢子萌发率和致病力都有一定影响。葡萄糖溶液最利于分生孢子的萌发和侵染。