前言 砷是一种确定的人类致癌物,摄人过量的砷化物可引起砷中毒。通过职业、生活和环境接触过量的砷均可引起砷中毒,我国多见由饮用高砷水而引起的慢性饮水型地方性砷中毒。砷中毒患者最常见的受累部位是皮肤,多见皮肤色素异常和掌跖角化,甚至发生皮肤癌。除了皮肤症状,砷中毒还可引起全身多器官损伤和肿瘤。 砷中毒的机制目前还不清楚,有人群资料证实慢性砷暴露可引起体内氧化应激反应增强,活性氧（ROS）生成增多,DNA链断裂,并影响机体的抗氧化系统。近年来,无机砷剂在临床用于治疗白血病,疗效显著,从而引发了其对肿瘤细胞抑制增殖、改变细胞周期和诱导凋亡作用及其机制的研究,但对正常皮肤细胞损伤的机制仍不清楚。 本研究以亚砷酸钠（NaAsO₂）为处理因素,以人皮肤角质形成细胞株（HaCaT）为研究对象,通过研究无机砷诱导HaCaT细胞氧化应激、对HaCaT细胞周期的影响和细胞凋亡的作用,探讨砷对人皮肤角质形成细胞的损伤作用,为慢性砷中毒的机制研究提供基础资料。 实验方法 1.细胞培养 HaCaT细胞株在5%CO₂、37℃条件下常规培养于完全培养基,隔日换液,待细胞进入对数生长期后,用胰蛋白酶-EDTA消化传代。 2.细胞处理 待细胞进入对数生长期,消化后以适宜密度接种于96孔板、6孔板或