【摘 要】
：
目的:免疫负性调节分子（例如细胞程序性死亡受体配体（PD-L1））显著减弱DC（树突状细胞）介导的免疫疗法。在本研究中,我们使用纳米材料micropoly载入 siRNA靶向沉默DC中PD-L1的表达,提高T细胞的免疫学效应并恢复其抗肿瘤免疫功能。探讨了靶向DC的PD-L1基因沉默并负载肿瘤抗原的DC疫苗对LLC肺癌荷瘤小鼠的治疗效果及其作用。方法:1.流式细胞术观察micropoly/cy3-
论文部分内容阅读
目的:免疫负性调节分子（例如细胞程序性死亡受体配体（PD-L1））显著减弱DC（树突状细胞）介导的免疫疗法。在本研究中,我们使用纳米材料micropoly载入 siRNA靶向沉默DC中PD-L1的表达,提高T细胞的免疫学效应并恢复其抗肿瘤免疫功能。探讨了靶向DC的PD-L1基因沉默并负载肿瘤抗原的DC疫苗对LLC肺癌荷瘤小鼠的治疗效果及其作用。方法:1.流式细胞术观察micropoly/cy3- siGAPDH对DC的靶向转染效率,q-PCR检测micropoly/ siPD-L1对DC上PD-L1的沉默效果。2.流式细胞术用于检测沉默PD-L1后DC成熟度的变化。3. siPD-L1沉默后的DC与LLC肺癌荷瘤小鼠的T细胞混合培养,ELISA试剂盒用于检测混合淋巴混合培养上清液中细胞因子TNF-a、IL-2的分泌情况,CCK8检测T细胞的增殖能力。4.混合培养72h后,q-PCR检测T细胞上PD-1、TIM3、BTLA的表达,流式细胞术检测混合培养后CD4+T细胞和CD8+T细胞的凋亡情况。5.将micropoly/ siPD-L1沉默后的DC疫苗尾静脉注射至C57BL/6小鼠体内,治疗小鼠肺癌,观察对肺癌荷瘤小鼠的治疗效果。6.通过磁珠分选筛选出各组脾脏中CD8+T细胞,检测其对肿瘤细胞的杀伤作用,并用ELISA检测小鼠血清中细胞因子TNF-a、IL-2的分泌,CCK8检测T细胞的增殖能力。7.收集来自每个实验组的脾和淋巴结的T淋巴细胞,Annexin V法检测T细胞的凋亡情况,流式细胞仪检测耗竭性T细胞表型变化。结果:1.流式检测表明micropoly/ siPD-L1转染24h后,对DC的转染效率达70%以上;Q-PCR检测micropoly/ siPD-L1体外转染DC细胞24h后,对PD-L1的沉默效率可达74%。2.流式检测结果表明沉默PD-L1基因,可促进DC成熟。3.具有Micropoly/ siPD-L1基因沉默的DC疫苗可以促进T淋巴细胞分泌TNF-a、IL-2的能力,并且可以显著促进T细胞增殖。4.采用Micropoly/ siPD-L1基因沉默的DC疫苗,可以调控耗竭性T细胞表型PD-1、TIM-3、BTLA的表达,并且可以抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的凋亡。5.将micropoly/ siPD-L1沉默PDL1基因并负载抗原后的DC疫苗,尾静脉注射至C57BL/6肺癌荷瘤小鼠体内进行治疗,它可以显著抑制肺癌的生长速度,增强小鼠的抗肿瘤能力。6.在该研究中建立的micropoly/ siPD-L1转载体系治疗小鼠后,可以增强细胞毒性T细胞的杀伤作用,它分别促进细胞因子TNF-a、IL-2的分泌,并激活T淋巴细胞的增殖。7.小鼠脾脏中CD8+T细胞和CD4+T细胞的凋亡均明显减少,可调节和抑制T细胞表型的变化。结论:1.本研究构建micropoly/ siPD-L1转染模式,能将 siRNA靶向转染至DC细胞中,并有效降低PD-L1的表达水平。2.应用micropoly/ siPD-L1沉默PD-L1基因并负载肿瘤抗原的DC疫苗,可显著增强肺癌荷瘤小鼠T淋巴细胞的各型免疫学功能。3.应用micropoly/ siPD-L1沉默PD-L1基因并负载肿瘤抗原的DC疫苗可有效治疗小鼠肺癌,它可以逆转T细胞耗竭,并显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫力。
其他文献
党的十九大报告明确指出,要构建现代职教体系,进一步推进校企合作,扩大产教融合的力度,产教融合已上升为我国职业教育未来发展的主题。“产”和“教”分别代表的是产业与教育,即职业教育和产业发展两者之间的深度融合与合作。良性的职业教育为产业发展提供源源不断的人才,促进了产业发展的同时又补充了职业教育对人才培养的革新模式,实现产教融合双向互动的过程。产教融合发展的背景下,我国职业教育进入新阶段,“十二五”以
方言作为一种极具特色的地域文化符号,与电影艺术相融合,带给受众别样的视听审美感受。伴随新世纪的到来,方言电影的市场逐步升温,其数量的增加及质量的提高,是有目共睹的事实,并呈现出强劲的发展势头。本文以电影中的方言台词为研究对象,主要采用文献研究法、比较分析法、文本分析法等研究方法,对方言电影中的台词的审美功能进行研究,主要围绕几下五个方面展开:第一,辨析方言电影与电影方言,阐述相关特征,从审美角度突
“不知法不免责”这一法谚在我国的刑法理论和司法实践中一直有着巨大的影响力,根据这一原则,行为人的违法性认识错误不影响对其的定罪和量刑。但在现代社会,一味地坚持“不知法不免责”的做法正面临着严峻的挑战。刑法中法定犯比重的大幅增加、经济的发展与对外开放造成的人口频繁流动,这些都会引发大量因不知法律而违法的现象。长期以来,我国刑法理论界对于违法性认识的研究范式一直局限于违法性认识在犯罪构成体系中处于何种
色彩与素描是造型艺术不可分割的两个方面。色彩的独立性也越来越得到艺术家的重视,这让色彩成为惹人注目的要素和画家艺术探索的中心。本文以江南题材油画风景为例分析其色彩语言。笔者是在掌握了色彩基本原理和一般写生基础之上探索色彩语言的类型和作用,通过对名家名作中色彩语言的赏析归纳来学习如何建立个性化的绘画形式、塑造艺术形象,从地理环境、区域文化的视角对其色彩品貌进行挖掘,并探寻江南题材油画中蕴含的寓意性、
研究目的:足球比赛的质量,关键在于运动员的体能。所以,本研究从云南省少年足球运动员的体能为切入口,尝试构建云南省少年足球运动员体能训练体系。目前,关于少年足球运动员的体能都是从速度、力量、柔韧等一般体能入手,本研究从少年生长发育的特点考虑,构建适用于少年足球运动员的体能训练体系,探索出适用于少年足球运动员的体能训练体系,希望能为后续的研究提供一定的参考价值。研究方法:（1）利用文献资料法来查找本研
新鲜生菜因其茎叶鲜嫩爽口、富含多种营养成分等特点备受人们喜爱;然而由于其含水量高、质地娇嫩、呼吸代谢旺盛等原因,容易受到高温等外界条件和自身因素的影响,使得生菜采摘后不易保存,导致其商品价值骤降以及营养成分迅速流失;而抗氧化系统则是延缓果蔬衰老、清除果蔬体内氧化损伤因子——活性氧的重要机制;因此,如何采用非化学的安全手段调控采后生菜的衰老进程、减少其体内营养物质的流失并尽可能延长其货架期成为了急需
保罗·克利（Paul Klee 1879-1940）德籍瑞?裔艺术家,在现代艺术发展史上是尤为重要的?物。不仅对??世纪的西?现代绘画艺术产?了重要影响,也在现代建筑、设计等领域产?影响。保罗·克利绘画风格的转变是由于从?开始对内在情感的表达转变成了对科学,对?然的认知。本?按照保罗·克利从?开始的平?性绘画发展为抽象化的绘画,最后?成了有意味的符号的绘画风格这条艺术发展的脉络,研究保罗·克利的绘
近年来基于深度机器学习的人工智能方法,由于可以弥补基于系统要素统计模型所得到的算法与实际场景不符的不足,在移动通信领域得到了广泛的应用研究。本文尝试将深度机器学习方法用于MIMO和OFDM系统信号检测,设计了相应的深度学习检测方法。主要工作如下:一、针对CSI已知条件下的MIMO信号检测问题,设计了改进的Det Net深度学习检测方法。提出的简化的Det Net检测网络,删除了一些冗余的输入向量,
背景结直肠癌是一种在世界范围内严重危害人类健康的消化道恶性肿瘤之一,据世界卫生组织最新报道,结直肠癌发病率位居所有恶性肿瘤的第三位,致死率是第二位。人们首次发现EYA基因是在研究果蝇眼睛的发育过程中发现的。EYA为SIX1的共激活因子,SIX-EYA复合物在不同类型的肿瘤中高表达,包括卵巢癌、恶性周围神经鞘瘤、乳腺癌等。研究发现在人结直肠癌中SIX1表达异常上调,关于EYA1与结直肠癌的发生发展及
随着我国城镇化进程的不断推进,农民工群体也随之产生。在我国城镇化的建设过程中,农民工群体的重要性不断提高。其中,新生代农民工已经取代第一代农民工,成为我国农民工的中坚力量。但是受到户籍制度的影响,在我国劳动力市场中,新生代农民工的地位也比较低,属于城市的边缘人。从本质上看,社会保险是对社会收入进行二次分配。通过参与社会保险,农民工可以有效规避生活风险。但是我国目前实施的社会保险制度结构主要有城乡二