目的 在建立大鼠内毒素休克模型的基础上观察主动脉平滑肌细胞超微结构有何改变；通过检测各组主动脉平滑肌细胞内IP₃ Ⅰ型受体的表达和体外主动脉环灌流实验从而探讨内毒素休克中血管低反应性的机制。 材料和方法 健康雄性Wistar大鼠，体重220-250克，分为四组：①大剂量脂多糖（LPS）组：静脉注射LPS 10mg／kg。②小剂量LPS组：静脉注射LPS5mg／kg。③正常对照组：静脉注射同等体积的生理盐水。④大剂量LPS处死组：静脉注射LPS 10mg／kg后监测平均动脉压的变化，在平均动脉压开始出现上升波时处死。每只动物观察6小时，监测平均动脉压和心率的变化，分别于注药前和注药后30分钟，60分钟，90分钟，2小时，3小时，4小时，6小时取血0.5ml，离心后取上清-70℃冻存。观察结束后取胸主动脉，进行以下操作。 1．常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察形态学的改变。 2．将标本用2.5％戊二醛和1％锇酸双固定，常规超薄切片，铀铅双重染色，JEM-1200EX透射电镜下观察主动脉平滑肌细胞超微结构的改变。 3．双抗体夹心ELISA法检测血清中TNFα浓度。 4．免疫组化检测各组标本主动脉平滑肌细胞内IP₃ Ⅰ型受体的表达。 同时做体外实验检测小剂量TNFα对主动脉环的收缩功能有何影响。取健康大鼠胸主动脉，小心分离周围的结缔组织后剪成3-5mm长的主动脉环备用。将标本分为4组，分别给予TNFα5μg／1或Kreb液，孵育1小时后给予10^-7mmol／L血管紧张素Ⅱ，记录收缩幅度。每个血管环对血管紧张素Ⅱ的反应以收缩幅度和给予KCl后的最大收缩幅度之比来表示。结果 1.平均动脉压的变化:Wistar大鼠注射LpS（10m扩kg或sm岁kg）后首先出现一个下降波，在90一120分钟左右逐渐上升至正常水平左右，随后出现一个持续下降波直至死亡。存活的大鼠则无明显的第二个下降波。 2.心率的变化:大鼠在注射LPS的过程中出现心率下降，随后上升，在90一120分钟左右持续下降直至观察结束。存活大鼠心率下降幅度明显低于死亡者。 3.血清，rN Fa的测定:对照组在所有时间点都未检测到TNFa，而LPS10m扩kg组和sm留kg组在注射LpS后，血中TNFa在30分钟时开始升高，在90分钟时达到高峰，随后逐渐下降。大剂量LPS组的TNFa水平低于小剂量组。 4.胸主动脉平滑肌光镜下改变:镜下发现与对照组相比，①②④组胸主动脉平滑肌细胞结构完整，排列规则，未见明显的病变。 5.胸主动脉平滑肌电镜下改变:结果发现与对照组相比，①②④组标本均可见到囊泡减少，密斑密体减少，肌丝丰富排列规则，无破坏及扩张，走行与细胞长轴平行。大剂量LPS组可见细胞早期调亡的表现。 6.IP3I型受体在各组主动脉平滑肌细胞中的表达:sm扩kgLPS组主动脉平滑肌细胞内IP3I型受体的表达明显增强，而10m岁kgLPS组与对照组相比无统计学差异。 7.TNFa对主动脉环收缩功能的影响:去内皮组主动脉环无论是在有钙的条件还是在无钙的条件下给予5林扩L TNFa孵育l小时后对血管紧张素n的反应性都明显增强。结论 1.电镜下发现三个实验组均出现囊泡减少，密斑密体减少，说明内毒素休克时大血管舒张及低反应性可能与细胞内收缩物质减少或消耗增多有关。大剂量LPS组部分主动脉平滑肌细胞出现早期细胞调亡的征象扩提示在大剂量LPS组所致的内毒素休克中细胞结构破坏也参与了低血压的形成。2.免疫组化和体外主动脉环实验结果提示，rN Fa可以刺激主动脉平滑肌细胞内IPal型受体表达增加。