越橘果实中花色苷的提取分离、定量和结构鉴定研究

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本文对杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium SPP.)植物越橘果实所含花色苷的提取、定量和分离鉴定进行了研究。结果表明:越橘果实中普遍存在花色苷类物质,而且含量较高。有关资料报道:越橘果实所含的花色苷可以消除眼睛疲劳,增加视力;而且具有降低胆固醇、抑制脂蛋白氧化、抗氧化、抗衰老、抗溃疡、抗炎和抗癌等生理功能及显著的药用功能。本文以开发利用越橘资源、探明越橘花色苷主要成分为目的,对其进行研究,并为越橘花色苷提取分离的产业化生产提供新方法。 高效液相色谱法(HPLC)是一种非常准确的定量分析方法。四种对照品分别用0.1%的HCl甲醇:水=1:4溶液溶解后用高效液相色谱法进行分析测定。液谱的具体分析条件是:流动相A:甲醇;B:10%甲酸;流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:520nm、517nm、530nm、525nm;梯度洗脱:0-25min,B溶液5%-60%;20-25min,B溶液60%-100%;25-30min,100%B溶液。最后结果:对照品矢车菊色素-3-葡萄糖(CY-3-GLC)的线性范围在0.018-0.030 g、矢车菊色素-3-半乳糖(DI-CH)的线性范围在0.160-0.800 g、二甲基翠雀色素-3-葡萄糖(OE-CH)的线性范围在0.044-0.440 g、二甲基翠雀色素-3-半乳糖(MA-GA)的线性范围在0.224-0.112 g。均呈良好的线性关系,四种对照品平均回收率分别为98.58%、96.34%、95.45%、97.93%。回收率均在90%以上,说明此方法可行,准确度较高。用此相同条件分析测定5个样品中4种花色苷的含量和各样品总花色苷含量。 用色价法、高效液相色谱法(HPLC)对越橘果实中所含的花色苷进行定量分析。先用色价法粗略比较红豆越橘、笃斯越橘、Chignecto、CA-206、NB-3越橘果实中花色苷含量的差异及用不同溶剂浸提同一越橘果实中花色苷含量的方法差异;再用RP-HPLC精确测定这五个样品中4种花色苷(矢车菊色素-3-葡萄糖;矢车菊色素-3-半乳糖;二甲基翠雀色素-3-葡萄糖和二甲基翠雀色素-3-半乳糖)的含量和各样品总花色苷含量。两种方法所得结果一致,5个样品总花色苷含量由高到低依次为:Chignecto、CA-206、NB-3、笃斯越橘、红豆越橘。其相应总花色苷含量分别为725.413 mg/100g鲜果、357.224 mg/100g鲜果、350.380mg/100g鲜果、343.669 mg/100g鲜果、147.759 mg/100g鲜果。而且五个样品果实所含花色苷的种类和含量不同。其中矢车菊色素-3-半乳糖苷是普遍存在的一种花色苷,而花色苷矢车菊色素-3-葡萄糖不存在于笃斯越橘和红豆越吉林农业大学硕士学位论文越橘果实中花色昔的提取分离、定量和结构鉴定研究橘果实中,红豆越橘果实中只含四种花色普的一种。因此,不同种、品种越橘的基因型差异导致其果实中所含花色普种类及含量的不同。 为了研究越橘花色普的提取分离工艺,以红豆越橘为样本,进行分离。在恒温水浴(60℃)条件下用85%乙醇浸提3小时,浓缩。将乙醇所得浓缩液流过NKA一12大孔吸附树脂层析柱,利用水和30%、50%、90%的乙醇溶液进行梯度洗脱、提纯;将30%乙醇所得溶液浓缩后再过聚酞胺层析柱,并用同样的方法进行梯度洗脱。最后从30%乙醇的浓缩液中获单体化合物I。 对单体化合物工进行物化性质分析:熔点为1 81、182℃;溶于水,易溶于甲醇,难溶于丙酮的黑红色粉末。用薄层层析法、高效液相色谱法、质谱法和核磁共振法鉴定化合物为矢车菊色素一3一半乳糖(Cyanidine一3一gaiaetoside),系统命名为:2一3‘,遵‘一二夯基苯基一5,7一二夯基并毗喃一3一。一p一D一半乳糖普。分子量:499;分子式为:CzlHzloll。 本文对提取和分离越橘果实中所含的花色谷有效成分提供了科学的依据,并为深入开发、利用越橘资源,尤其是对其花色普的产业化生产提供新方法.将有助于进一步创造经济效益和社会效益。
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