青藤碱对THP-1源性泡沫细胞模型胆固醇代谢及NF-κB相关炎症因子影响的实验研究

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实验目的:  本实验采用体外实验方法,观察青藤碱对ox-LDL刺激的THP-1源性泡沫细胞胆固醇代谢、NF-ΚΒ及相关炎症因子IL-1β、IL-8、MCP-1分泌、释放的影响,进一步探讨青藤碱防治动脉粥样硬化的可能作用机制。  实验方法:  以THP-1细胞,分为对照组(完全培养基)、不同浓度青藤碱组(1μg/ml、20μ g/ml、40μ g/ml、80μ g/ml)、5μ g/ml辛伐他汀组及100μ g/ml地塞米松组。用ox-LDL刺激THP-148小时建立AS泡沫细胞模型;按分组给予不同含药培养基,对照组给完全培养基,作用12小时、24小时及48小时后,收集上清液及细胞,用酶比色法检测细胞内胆固醇含量变化;用ELISA检测IL-1β、TNF-α及MCP-1的量和NF-ΚΒ活性。  实验结果:1.藤碱具有一定的抑制泡沫细胞生长的作用,小于100μ g/ml时作用不明显。大于100μ g/ml则细胞生长明显受到抑制,甚至死亡。  2.与对照组比较,各药物组胆固醇、炎症因子IL-1β、IL-8、MCP-1含量均明显减少差别具有统计学意义(P<0.01),呈时-效关系。  3.24小时和48小时除青藤碱1μ g/ml组外,各药物组NF-ΚΒ含量均低于对照组,差别显著(P<0.01或P<0.05),12小时各组差异不明显(P>0.05)。  4.与辛伐他汀组比较,青藤碱组IL-1β、IL-8含量减少更多,以24小时时间点更明显,差别显著(P<0.05);MCP-1含量具有较辛伐他汀减少更明显,但无显著性差异(P>0.05)。  5.与地塞米松组比较,青藤碱组炎症因子IL-1β、IL-8、MCP-1和NF-ΚΒ含量减少均不及前者明显,差别显著(P<0.01或P<0.05),而胆固醇变化两者无显著性差异(P>0.05)。  实验结论:1.青藤碱剂量在1-100μ g/ml范围时对细胞生长无明显抑制;大于100μ g/ml时,随浓度增大抑制作用增强,呈量-效关系。  2.青藤碱可能通过抑制泡沫细胞NF-ΚΒ的活性,抑制炎症因子IL-1β、IL-8和MCP-1释放,发挥抗炎作用,减轻胆固醇代谢紊乱,从而改善动脉粥样硬化。其抗炎作用较地塞米松弱,但比辛伐他汀强。
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