神经营养因子4及其受体在母牛生殖系统中的表达与部分功能研究

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本研究系统探索了神经营养因子4(NT4)及其受体酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)在卵泡期和黄体期母牛卵巢、输卵管和子宫组织中的分布及表达规律,并且研究了促性腺激素FSH和LH对卵泡颗粒细胞中NT4和TrkB表达的影响及NT4/TrkB通路对颗粒细胞中促性腺激素受体表达的影响。结果表明,在卵泡期,NT4和TrkB于腔前卵泡的卵泡细胞,有腔卵泡的颗粒细胞和内膜细胞,子宫腺和子宫腔上皮细胞,输卵管黏膜上皮细胞表达;在黄体期,NT4和TrkB于卵泡细胞、黄体细胞,子宫腺及子宫腔上皮细胞和输卵管黏膜上皮细胞表达。通过比较发现:卵巢组织中NT4 mRNA和输卵管组织中TrkBmRNA的表达量黄体期极显著高于卵泡期;黄体期的卵巢组织中NT4 mRNA表达量极显著高于子宫和输卵管中的表达量,输卵管组织中TrkB mRNA表达量极显著高于卵巢和子宫中表达量;NT4和TrkB mRNA在卵泡期各组织间表达量差异不显著。卵泡颗粒细胞体外培养实验发现:促性腺激素可促进卵泡颗粒细胞中NT4 mRNA表达,以处理8h,分别添加10μg/mL LH和120μg/mL FSH组为最佳;促进NT4蛋白表达量,以处理8h,分别添加LH或FSH 20ug/mL组为最佳。同时,外源添加NT4可促进卵泡颗粒细胞中LHR和FSHRmRNA的表达,前者表达量以处理8h,浓度30μg/L组为最佳,后者以处理16h,浓度100μg/L组为最佳;而K252a能够阻断NT4/TrkB通路,进而抑制卵泡颗粒细胞中FSHR和LHR mRNA的表达,以处理8h,K252a浓度10/μg/L组为最佳。以上研究结果表明NT4和TrkB在不同发情周期母牛的生殖组织中表达参与生殖调控;NT4在颗粒细胞中表达具有一定促性腺激素时间和剂量依赖性,并且说明NT4/TrkB通路对颗粒细胞中促性腺激素受体表达具有调控作用。
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