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背景和目的近年来由于社会和环境因素的影响，不孕不育的发生率逐渐增高，从此辅助生殖技术（Assisted reproductive technology，ART）也得到了广泛的开展。但是辅助生殖技术的临床妊娠率却一直徘徊在较低的水平。其中一个重要的因素即子宫内膜的容受性（uterine receptivity）降低，正常状态的子宫内膜仅在一个极短的关键时期内具有容受胚胎的能力（即子宫内膜具有容受性），通常在月经周期的20～24d，即LH高峰后的第7～11d。此时子宫内膜表现出最大的胚泡种植容受性。其腺体增大弯曲，腺腔内含有大量粘液及糖原，内膜血管充血，间质细胞向蜕膜细胞转化，且其变化与胚胎发育同步，使之利于胚胎的黏附和植入。另外，临床上发现子宫内膜太薄（＜7mm）的患者妊娠率也较低，增生期内膜太薄势必影响分泌期的容受性。而临床上对这类患者，如何改善其子宫内膜的厚度仍没有公认的、效果肯定的疗法。目前研究发现多种因素可以影响子宫内膜的容受性和滋养层的黏附性，子宫内膜在雌激素、孕激素（E2、P）作用下分泌多种细胞因子及黏附分子，通过内分泌、旁分泌方式的调节，使子宫内膜能容受胚胎植入，即通过类固醇激素-免疫细胞-细胞因子、黏附分子网络来实现。多种调控分子参与了胚胎着床过程，如白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF），整合素家族（integrins）、胞饮突、降钙素、血管表皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor，IGFs）等。血管内皮生长因子（VEGF）为特异性的促血管内皮细胞丝裂原并且具有促血管通透性、血管内皮细胞分裂、增生、诱导血管生成等作用。近年来发现在子宫血管生成过程中血管内皮生长因子（VEGF）起重要作用。无论是在子宫内膜修复的增殖早期还是在容受胚胎着床的分泌中期，VEGF在子宫内膜都有较高的表达。在胚胎植入子宫内膜，与母体建立血液联系的过程中血管生成无疑是最活跃的。围着床期VEGF增多，可能有助于子宫内膜的容受性，以利于胚胎着床和早期绒毛血管的形成，VEGF不足时，子宫的容受性下降，早期绒毛形成不良。表皮生长因子（EGF）存在于各期子宫内膜的各种细胞中，为子宫内膜细胞生长和分化调节的自分泌及旁分泌因子，在月经周期的增殖期EGFmRNA水平很低，蛋白表达于腔上皮细胞和间质细胞，腺上皮细胞未见表达，以后逐渐平稳增加，在分泌期的种植窗期（第19～21天）有最高表达，并定位于分泌中期腔上皮细胞最表面，EGF调节子宫内膜上皮细胞和间质细胞的增殖，在子宫内膜的表达受体内E2、P的调节，并发现在胚胎着床部位的子宫内膜有EGF的高表达，因此，EGF在胚胎着床方面起重要作用。胰岛素样生长因子（IGFs）是一多功能生长因子，对细胞增殖、分化和代谢起重要的作用。正常月经周期中IGFs、IGFs受体及其结合蛋白均在子宫内膜上有不同程度的表达，其主要来源为子宫内膜分泌。IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ在局部发挥有丝分裂原作用，还可诱导细胞分化。IGF-Ⅰ基因和mRNA主要表达在增殖期和分泌早期内膜，IGF-Ⅱ基因和mRNA及Ⅰ、Ⅱ型IGF受体mRNA则主要表达在分泌期内膜和孕早期蜕膜。其表达的时间和细胞特异性，提示IGFs可能与子宫内膜的周期性变化及容受性有关。生长激素（growth hormone，GH）是垂体分泌的肽类激素之一，临床应用生长激素辅助促排卵治疗，可增强卵巢对促性腺激素的（gonadotropin，Gn）的敏感性，降低人绝经期促性腺激素（HMG）的用量，改善卵巢的功能，间接调节卵泡发育，改善卵泡质量及获取更多的成熟卵子。研究表明：子宫也是GH合成和作用的一个非垂体位点，并且以旁分泌和自分泌的方式调节生殖机能。在绵羊中，GH可通过提高子宫乳蛋白mRNA的水平和子宫层海绵状腺体的数量以增加子宫内膜和妊娠子宫的数量。Sbracia M等最新研究发现人和鼠的子宫内膜存在生长激素受体，在分泌中晚期子宫内膜腺细胞及早孕蜕膜组织中呈强阳性表达，认为生长激素在胚胎着床中起着非常重要的作用。本研究以实验动物小鼠为模型，观察生长激素对小鼠动情前期即增生期子宫内膜厚度及增生期子宫内膜腺、腔上皮和间质中VEGF、EGF、IGF-Ⅰ表达的影响，探讨GH对子宫内膜微环境的影响并估计GH对子宫内膜厚度及子宫内膜容受性的影响，为辅助生殖技术的临床用药提供理论根据。材料与方法实验动物购于郑州大学实验动物中心，50只雌性昆明小鼠随机分成两组。实验组为注射生长激素（GH）组，对照组为注射生理盐水（NS）组。应用免疫组化SP法检测子宫内膜VEGF、EGF、IGF-Ⅰ的表达，利用多功能图像分析仪测量子宫内膜的厚度。实验数据应用SPSS11.5统计软件包进行统计学处理，计量资料以均数±标准差（（?）±s）表示，采用单因素方差分析判断组间差异，两组间数据采用两样本均数t检验，以a=0.05为显著性检验水准。结果1．GH组子宫内膜厚度为412.86±0.70μm，对照组为381.27±0.35μm，两组比较差异有显著性（P＜0.05）。2．两组VEGF、EGF、IGF-Ⅰ的表达部位相同。3．VEGF主要表达于子宫内膜腺上皮胞浆、胞膜，间质的表达较弱；GH组VEGF在子宫内膜腺上皮胞浆、胞膜、腺体的表达强度明显高于对照组，两组相比差异有显著性（P＜0.05），VEGF在间质的表达两组相比差异无显著性（P＞0.05）。4．EGF主要表达于子宫内膜的腺上皮、腺腔，间质细胞有中等量的表达；GH组EGF的表达强度明显高于对照组，两组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。5．IGF-Ⅰ主要表达于小鼠子宫内膜的间质细胞，在腺上皮、腺腔有微弱表达。GH组的IGF-Ⅰ在间质细胞的表达强度明显高于对照组，两组相比差异有显著性意义（P＜0.05），但在腺上皮、腺腔的表达两组相比无统计学意义（P＞0.05）。结论1．生长激素可改善小鼠增生期子宫内膜厚度，提示生长激素可能在子宫内膜腺体增生、间质分化中起重要的作用。2．生长激素可以促进子宫内膜一些生长因子：VEGF、EGF、IGF-Ⅰ的表达，从而改善子宫内膜的微环境。3．VEGF、EGF、IGF-Ⅰ共同表达于子宫内膜，它们之间可能相互作用、相互制约共同调节子宫内膜的生化改变。4．生长激素作用于小鼠子宫内膜发生的一系列改变，说明生长激素在改善子宫内膜的容受性方面起到一定的作用。