基于贵金属纳米颗粒的表面增强拉曼光谱免疫层析法的研究

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鉴于表面增强拉曼光谱(SERS)的高灵敏度和免疫层析法(ICA)的高特异性,本文以贵金属纳米颗粒为免疫探针载体,以对巯基苯甲酸(MBA)为拉曼活性标记物,建立了两种高灵敏的表面增强拉曼光谱-免疫层析法(SERS-ICA),并应用于小分子化合物的定量检测,主要研究内容如下:一、建立了基于金纳米颗粒(Au NPs)的多组分检测的SERS-ICA。在试纸条上设置两条检测线(T线),实现了对两种β-激动剂(溴布特罗与克伦特罗)和五种氟喹诺酮类抗生素(恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、依诺沙星)的同时定量检测。在最优条件下,SERS-ICA检测这七种物质的灵敏度(IC50)依次为0.15,0.073,0.11,0.095,0.14,0.15,0.17 ng m L-1,检出限(LOD)依次为0.41,0.94,0.30,0.39,0.46,0.41,0.51 pg mL-1。猪肉样品中溴布特罗和恩诺沙星的加标回收率在88.7%-108.3%之间,相对标准偏差在4.1%-7.7%之间(n=3)。二、建立了基于金-银纳米花核壳结构纳米颗粒(AuNFs@Ag NPs)的SERS-ICA,实现了对溴布特罗的高灵敏高特异性的定量测定。AuNFs@Ag表现出了很强的SERS增强效应,有效地提高了灵敏度。在最优条件下,溴布特罗的灵敏度(IC50)和最低检出限(LOD)值分别为380 pg mL-1和0.5 pg m L-1;SERS-ICA与克伦特罗呈现8.48%的交叉反应率,与其他5种化合物均没有交叉反应;猪肉和猪尿样品中溴布特罗的加标回收率在95.8%-108.0%之间,相对标准偏差在2%-6.3%之间(n=3)。本文主要研究多组分同时检测的SERS-ICA及制备具有较高SERS增强效果的新型纳米颗粒并在此基础上建立单组分检测的SERS-ICA,所建立的两种SERS-ICA兼具SERS和ICA的优点,简便、快速、低成本、超灵敏,可应用于现场高灵敏快速检测。
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