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目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、Bcl-2、Bax在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义。
方法:取东南大学附属中大医院、江苏省肿瘤医院两院于2004.12-2006.7年电切或开放手术膀胱肿瘤标本共59例,年龄36~83岁,男49例,女10例。均经病理学证实为膀胱移行细胞癌,另有正常膀胱组织13例(经膀胱前列腺摘除术中获得)。肿瘤标本均行HE染色诊断,按WHO病理分级标准,按UTCC临床分期,T<,1>34例,T<,2>15例,T<,3~4> 10例。膀胱肿瘤术后常规行羟基喜树碱膀胱内灌注化疗。本组59例标本中,未经化疗的初发肿瘤30例,其中G<,1>18例,G<,2>9例,G<,3>3例,T<,1>20例,T<,2>7例,T<,3~4>3例。化疗后复发肿瘤29例,其中G<,1>14例,G<,2>8例,G<,3>7例,T<,1>14例,T<,2>8例,T<,3~4>7例;其中复发一次15例,复发两次7例,复发三次4例,复发超过三次3例。单发性肿瘤42例,多发性肿瘤17例。膀胱肿瘤标本及正常膀胱粘膜标本用SP免疫组化技术检测P-gp、MRP蛋白的表达,使用RT-PCR的方法检测Bcl-2、Bax基因的表达。
结果:(1)初发膀胱移行细胞癌组织中P-gp、MRP阳性表达分别为50%(15/30),47%(14/30);化疗后复发膀胱肿瘤组织中P-gp、MRP、阳性表达分别为86%(25/29),68%(20/29);正常对照P-gp、MRP阳性表达分别为7.7%(1/13),7.7%(1/13)。正常膀胱组织、初发膀胱肿瘤组织、化疗后复发膀胱肿瘤组织内P-gp表达两两比较都有显著性差异。(P<0.05)。初发膀胱肿瘤组织、化疗后复发膀胱肿瘤组织内MRP表达显著高于正常膀胱组织。(P<0.05)。(2)P-gp表达水平与病理分级、临床分期密切相关,G<,1>、G<,2>和G<,3>阳性率分别为50%(16/32),88%(15/17),90%(9/10),T<,1>、T<,2>和T<,3~4>阳性率分别为53%(18/34),87%(13/15),90%(9/10)。(3)初发膀胱移行细胞癌组织中Bcl-2、Bax与OAPDH灰度比值分别为0.796±0.44、1.81±0.51:化疗后复发膀胱肿瘤组织中Bcl-2、Bax与GAPDH灰度比值分别为1.18±0.69、1.49±0.67;正常膀胱组织Bcl-2、Bax与GAPDH灰度比值分别为0.277±0.023,0.491±0.031。正常膀胱组织、初发膀胱肿瘤组织、化疗后复发膀胱肿瘤组织内Bcl-2、Bax表达两两比较都有显著性差异。(P<0.05)。(4)Bcl-2表达水平与组织分级、临床分期密切相关,与内参GAPDH相比,其灰度比值(%)在G<,1>、G<,2>和G<,3>中分别为48±10、117±14和211±28;其灰度比值(%)在T<,1>、T<,2>和T<,3>中分别为56±14、118±12和208±33。Bax表达水平也与组织分级、临床分期密切相关,与GAPDH相比,其灰度比值(%)在G<,1>、G<,2>和G<,3>中分别为213±17、153±21和56±16;其灰度比值(%)在T<,1>、T<,2>和T<,3>中分别为208±14、157±15和48±8。(5)P-gp蛋白表达与Bcl-2呈正相关(r=0.658,P<0.05):与Bax呈负相关(r=-0.667,P<0.05)。(6)单发性肿瘤中P-gp阳性表达为59.5%(25/42),多发性肿瘤中P-gp阳性表达为88.2%(15/17);单发性肿瘤中,与内参GAPDH相比Bcl-2的表达灰度比值(%)为72±37,,与内参GAPDH相比Bcl-2的表达灰度比值(%)为165±63;单发性肿瘤中,与内参GAPDH相比Bax的表达灰度比值(%)为191±40,多发性肿瘤中,与内参GAPDH相比Bax的表达灰度比值(%)为115±64。多发性肿瘤中P-gp、Bcl-2的表达明显高于单发性肿瘤,Bax表达明显低于单发性肿瘤。
结论:膀胱癌组织P-gp、Bcl-2、Bax可作为判断膀胱移行细胞癌的恶性程度指标。P-gp、Bcl-2和Bax可能与膀胱癌耐药机制有关。联合检测P-gp、Bcl-2和Bax可能对判断膀胱癌化疗效果及预后有一定的意义。P-gp、Bcl-2的高表达可能是膀胱癌术后复发有关。