海葵毒素(anthopleurin)是一类由海葵毒液中分离到的能增强哺乳动物心肌收缩能力的多肽类毒素,相对分子质量在5kD左右,其作用于钠离子通道,延长去极化过程中钠通道的开放时间,致使钠离子内流增加,增强心肌收缩。海葵毒素对心肌产生生理活性的过程中,对实验哺乳动物的心率和血压都没有不利的影响,可望开发成为新一代安全有效的强心药物。在所有的海葵毒素中,anthopleurin B(Ap-B)型表现出最强的心肌收缩活性。本研究按照毕氏酵母的偏爱密码子,设计并合成了Ap-B的基因序列,将合成基因序列导入毕氏酵母表达载体pPICZαC中,以电穿孔方法转化入毕赤酵母X33,并进行转化子的表型及高拷贝筛选,通过PCR鉴定和SDS-PAGE测定,筛选出高表达重组Ap-B(rAp-B)的酵母菌株。建立大规模(80L发酵罐)发酵体系,优化发酵条件。本实验的创新之处在于:在毕赤酵母中高效表达了rAp-B;利用80L发酵罐,通过改变发酵液的pH值、DO值(溶解氧)、培养液成分、加入甲醇速度等多个影响发酵过程的因素,确定了适合工业化生产rAp-B的最佳发酵条件,为rAp-B的生产提供了实验依据。