黑面神中含硫螺环缩酮倍半萜及其活性研究

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黑面神Breynia Fruticosa是大戟科黑面神属灌木,该属下有多个种,我国产有6种,均为传统药用植物,主要用于抗炎、降血脂和抗菌等作用。研究发现,从黑面神属植物中分离得到的含硫螺环缩酮倍半萜化合物breynins具有很强的口服降血脂活性,但关于其抗炎及其他活性成分,至今鲜有报道。Breynins结构特殊,自然界中极其罕见,前期活性追踪发现,breynins亦为黑面神中的抗炎活性成分,基于此,本文的主要研究内容如下:(1)黑面神全株经甲醇回流提取、正丁醇萃取、CG161M和Toyopearl在线二维柱层析以及Silica gel柱层析,初步富集得到倍半萜部位。再通过Silica gel、反相RP-18、CG161M、Sephadex等系列现代柱层析技术和制备高效液相、制备薄层色谱等分离纯化技术,从倍半萜富集部位分离得到11个纯度较高的单体化合物。经过质谱、核磁、高分辨质谱和圆二色谱等技术进行结构鉴定发现,此次分离得到10个breynins(1-10)和一个木脂素(11),其中化合物5-11已有文献报道,化合物1结构新颖,苷元上发生开环,且A环上连接有含硫乙酰氨基侧链。化合物2-4尚未见文献报道,糖基个数和种类发生变化。(2)10个breynins中,化合物5(已报道过的epibreynin D)为主成分,分别对倍半萜部位和化合物5进行抗炎和降血脂活性评价。醋酸所致的小鼠毛细血管通透性模型中,灌胃剂量50 mg/kg时,倍半萜部位即有明显的抑制小鼠毛细血管通透性的活性,抑制率达到37%,效果近似于灌胃10 mg/kg剂量的吲哚美辛。在50-200 mg/kg剂量范围区间,表现出了明显的量效关系。在完全弗氏佐剂诱导的大鼠类风湿性关节炎模型中,epibreynin D表现出明显的抗类风湿活性,灌胃剂量0.2 mg/kg/d时,大鼠腿足溃烂程度低于模型组,足肿胀度也明显减轻,与吲哚美辛阳性对照组(2 mg/kg/d)相比,抑制率达到46%;灌胃剂量为2 mg/kg/d时,与模型组比较,大鼠足部仅给药前期出现轻微肿胀,未观察到关节障碍,抑制率达到72%。此结果表明,epibreynin D具有很强的抗炎活性。在泊洛沙姆407诱导的小鼠急性高血脂模型中,倍半萜部位和epibreynin D都能够显著降低小鼠体内总胆固醇和甘油三酯含量,且epibreynin D比倍半萜部位具有更好的效果。倍半萜部位给药剂量10 mg/kg时,小鼠全血中总胆固醇和甘油三酯抑制率分别达到72.9%和70.3%,epibreynin D给药剂量0.5 mg/kg时,小鼠全血中总胆固醇和甘油三酯抑制率分别达到67.6%和73.1%。
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