‘黄金梨’属砂梨（P.pyrifolia Nakai）系统,是韩国园艺试验场采用新高和二十世纪杂交而成的中晚熟梨,具有抗逆性强,高产等优点,现在我国已大面积种植。而在我国主要梨产区如西北地区,黄河古道地区等,土壤盐碱化严重,有效铁供给不足,梨树缺铁黄化现象严重,制约着当地梨产业的进一步发展。前期本实验室研究结果表明,梨黄化叶片不仅Fe含量显著低于正常叶片,其N、K含量也显著低于正常叶片,同时,黄化叶片中赤霉素含量高于正常叶片。因此,本试验以安徽萧县黄河故道园艺场‘黄金梨’叶片为试材,首先测定了正常叶片、黄化叶片及不同处理黄化叶片中Fe、N代谢相关酶的活性;并通过荧光定量PCR技术,分析了Fe、N代谢、K⁺通道蛋白和GA信号转导相关基因的表达差异;应用ELISA（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）酶联免疫法测定了不同处理叶片中GA含量;分别采用ICP-AES（atomic emission spectrometer）电感耦合-等离子发射光谱法分别测定了叶片中Fe、N和K的含量。主要结果如下:1、黄化叶片中铁贮藏蛋白基因Fer1、Fer2、Fer3和铁氧化蛋白基因Fd1、Fd2的相对表达量显著低于正常叶片,不同浓度FeSO₄处理,黄化叶片从3 d开始复绿,随处理浓度增加,复绿斑点数增加,效果越好,同时Fer1、Fer2、Fer3和Fd1的相对表达量上升,显著高于未处理黄化叶片,且同一浓度处理中,在3 d和6 d时相对表达量最高,Fd2的相对表达量则一直成上升趋势。同时不同浓度Fe SO4处理,黄化叶片中Fe含量均增加。由此推测,叶面施Fe使黄化叶片中Fe代谢相关的基因的表达量上升,进而使得叶片内Fe含量增加。2、黄化叶片中硝酸还原酶基因NR、谷氨酰胺合成酶基因Fd-GOGAT、谷氨酸合酶基因GLIE相对表达量显著低于对照,经不同浓度FeSO₄处理,NR、Fd-GOGAT、GLIE相对表达量均上升,显著高于未处理黄化叶片;而黄化叶片中硝酸盐转运体基因NRT1.2的相对表达量显著高于对照,经不同浓度FeSO₄处理,NRT1.2相对表达量下降,显著低于未处理黄化叶片。对硝酸还原酶NR、谷氨酸合酶GS和谷氨酰胺合成酶GOGAT酶活的测定结果显示,经FeSO₄处理,均上升,显著高于未处理黄化叶片,与相关基因表达结果相一致。同时,不同浓度FeSO₄处理,黄化叶片中N含量均增加。初步推测,叶面施Fe可以促进N代谢,使其相关基因表达上升和酶活性增强,使N含量增加。3、黄化叶片中钾离子通道蛋白基因SKOR、TP3和TP11基因均显著低于正常叶片,经不同浓度FeSO₄处理,SKOR、TP3和TP11的相对表达量均上升,显著高于未处理黄化叶片,其中SKOR和TP3的相对表达量呈上升趋势,而TP11则在6 d时,相对表达量最高。同时,经不同浓度FeSO₄,黄化叶片中,K含量均增加。进而推测,叶面施Fe可以促进K⁺通道蛋白基因的相对表达量的上升,使K含量增加。4、黄化叶片中GID13、GID15和GA2ox基因的相对表达量均显著低于对照,经不同浓度FeSO₄处理,GID13、GID15和GA2ox的相对表达量均上升,显著高于未处理黄化叶片,同时FeSO₄处理,降低了黄化叶片中GA的含量,由此推测,叶面施Fe可以使GA信号转导中起负向调节相关基因的相对表达量的上升,进而使得叶片内GA含量的降低。