不同倍性鲫鲂及其原始父母本血液及血细胞比较研究

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本试验利用活细胞观察、组织涂片、光学显微镜、电子显微镜、聚丙烯酰胺凝胶电泳以及半定量PCR对不同倍性鲫鲂及其原始父母本血液组织进行了比较研究。主要研究结果如下:1.不同倍性鲫鲂及其原始父母本外周血红细胞平均核体积的大小均随着倍性增加逐渐增大,测量红细胞核的大小可以作为鲫鲂倍性鉴定的有效方式之一。多倍体鲫鲂外周血和造血器官中大量成熟红细胞的细胞核变形为哑铃状,且哑铃状核红细胞的比例随倍性的增加而升高,同时,多倍体鲫鲂外周血红细胞还存在大量的异形现象,如圆形红细胞,泪滴状红细胞等。多倍体鱼外周血红细胞这种形态上的变异也可以作为多倍体鱼的标志之一。2.对不同倍性鱼造血器官原始造血细胞的比较发现:多倍体鱼脾脏和肾脏拥有正常的造血功能,且原始造血细胞平均核体积的大小均随着倍性增加逐渐增大,但其数目则随倍性的增加而减少,推测其通过减少造血细胞数量来保持造血器官的正常大小。3.利用蛋白电泳技术对不同倍性鲫鲂及其原始父母本外周血血红蛋白以及血液全蛋白进行了分析比较。结果表明:五种鱼血红蛋白亚基在大小上没有明显差异,而血液全蛋白存在一定得差异。4.本次研究获得了不同倍性鲫鲂及其父母本cdc2 cDNA的部分序列。比较发现这五种鱼cdc2基因之间的相似性高达98.2%,说明cdc2cDNA序列在这五种不同倍性鱼具有高度保守性。半定量PCR研究结果表明cdc2基因的转录水平会随实验鱼倍性的递增而呈现升高趋势,这种现象可能与p34cdc2凝集染色体的相应功能有关,这与多倍体红细胞细胞核凝集程度较高,存在分裂增殖的趋势具有相关性。
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