Smurf2(Smad ubiquitination regulatory factor2)是泛素-蛋白酶体系统中E3泛素连接酶HECT家族中的一员，与TGF-β/Smad信号通路密切相关。Smurf2主要通过降解TGF-β/Smad信号通路中的受体(TGF-βR)，转录因子Smads，从而对TGF-β/Smad信号通路进行负调控。然而，Smurf2敲除小鼠在生长发育过程中并没有明显的异常，同时敲除Smurf2和Smurf1却导致胚胎致死，猜测可能是由于其同家族成员Smurf1在功能上对Smurf2具有代偿作用。　　 为了排除Smurf1对Smurf2功能上的补偿效应，精确研究其在不同生长发育阶段对TGF-β信号通路的调节机制，我们进行了Smurf2条件性敲除小鼠模型的构建。在条件性敲除质粒的构建方面，运用PCR技术将两端的同源臂和目标敲除外显子分段从小鼠基因组中扩增出来，通过构建中间质粒将所有的片段连接起来，并接入外源的loxP、Frt-Neo-Frt-loxP、DT序列，最终构建成完整的Smurf2条件性敲除质粒。在小鼠胚胎干细胞的转化与筛选方面，我们通过电转的方法将Smurf2条件性敲除质粒导入小鼠胚胎干细胞，通过G418和DT毒素进行筛选后，挑取ES细胞单克隆，并对这些克隆的基因组进行了正负向两轮PCR筛选，最终获得正确的目标胚胎干细胞克隆，为制备Smurf2条件性敲除小鼠模型和研究Smurf2的生物学功能奠定基础。