预先区域阻断在控制术中肝癌细胞血行播散的研究

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目的筛选出监测外周血肝癌细胞的有效敏感指标,以评估两种术式下肝癌患者外周及门静脉血中肝癌细胞扩散程度,并探讨外科操作对肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma, HCC,以下简称肝癌)患者的血行播散的影响。方法1.应用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)对40例肝癌、20例肝血管瘤及10例正常体检人群外周血中AFP mRNA、h-TERT mRNA及VEGF mRNA的表达量进行检测。2.随机选取预先区域性血流阻断术(预先阻断组32例)及Pringle’s阻断术(常规阻断组26例)共58例肝癌患者行肝癌切除,采集所有患者术前30min,术后30min,术后1d的外周血各4ml;采集进腹后未动肝癌及周围韧带时门静脉血(手术操作前)及游离完肝癌周围相关韧带准备行肝癌切除前门静脉血各4ml(肿瘤切除前),应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对标本行AFP mRNA及h-TERTmRNA定量检测。结果1.肝癌患者的三种指标的表达量明显高于对照组(肝血管瘤及正常人群),差异有统计学意义(P<0.01)。三种指标在肝癌患者中阳性率分别为77.5%、85%及72.5%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。且AFP mRNA、VEGF mRNA的阳性表达与肝癌患者血清AFP水平无关(P>0.05),h-TERT mRNA与患者血清AFP水平有相关性(P=0.01);三种指标与肝癌患者的TNM分期高度相关(P<0.01)。AFP mRNA在诊断肝癌特异性较高,而AFP mRNA和h-TERT mRNA联合检测敏感性和特异性更好。2.预先阻断组及常规阻断组术前外周血AFP mRNA、h-TERTmRNA比较无明显差异,术后两种基因表达差异显著(P<0.05)。其中预先阻断组及常规阻断组术后30min AFP mRNA表达分别为241.65±46.52、797.27±165.36,h-TERT mRNA表达分别为848.96±160.08、2851.59±595.92;术后1d AFP mRNA表达分别为55.26±10.64、374.83±80.45,h-TERT mRNA表达分别为189.11±32.50、1517.99±319.40。而预先阻断组及常规阻断组手术操作前门脉血中AFP mRNA、h-TERT mRNA比较无明显差异,术后两种基因表达差异显著(P<0.05)。其中预先阻断组及常规阻断组肿瘤切除前AFP mRNA表达分别为578.03±83.48、1947.11±278.97,h-TERT mRNA表达分别为2192.64±327.36、7609.42±1062.41。结论1.联合检测肝癌患者血中AFP mRNA及h-TERT mRNA水平能提高检测肝癌患者血中肿瘤细胞的敏感性及特异性。2.肝癌手术操作与肝癌外周血及门静脉血中AFP mRNA及h-TERT mRNA的增高呈明显正相关,可能是肿瘤细胞转移的原因之一。3.预先区域性肝血流阻断技术能降低门静脉及外周血中AFP mRNA及h-TERTmRNA,可能对肿瘤细胞的扩散有一定阻断作用。
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