在生命活动的代谢过程中不断产生各种自由基，其中超氧阴离子自由基（O₂）、羟基自由基（HO）、双氧水（H₂O₂）和脂自由基（ROO）是四种具有代表性的重要活性氧自由基，它们与生物体的衰老及许多疾病的发生都有重要关系。活性氧自由基对生物体的损伤作用虽然已经逐步获得公认，在20世纪受到了极大关注，然而，由于生物体内活性自由基的寿命非常短，导致通常情况下稳态浓度极低，而短寿命和低浓度意味着自由基的测定异常困难，特别是在生物活体内（in vivo）与直接原位（in situ）的检测目前尚未有突破。另外生物体内还存在着预防自由基损伤的内在抗氧化防护体系，因而至今为止人们尚无法直接动态观测到某些器官中活性氧自由基的产生，对它们的生成机制，生理作用及其动态损伤生物机体的过程都缺乏足够的认识和充分的实验证据，以至在临床上直接影响和限制了对许多疾病的治疗效果：对发展抗逆境植物的培植也是重大障碍。因此，针对动、植物生物活体内自由基开创新的分析与检测技术是分析化学学科发展中具有挑战性的前沿课题之一。 本论文基于活性氧自由基与荧光探针作用后荧光光谱性质的改变，开展了三大方面的工作。 （一）设计合成了两种用于超氧阴离子自由基识别检测的荧光探针——香草醛缩-8-氨基喹啉和2-吡啶甲醛苯并噻唑啉，用普通荧光法和流动注射荧光法对超氧阴离子自由基进行分析测定，研究了反应机理，并将其用于超氧阴离子自由基和超氧化物歧化酶活性的测定。 （二）利用对苯二甲酸钠捕获羟自由基后荧光增强，用流动注射-荧光法研究了玉米花粉多糖及不同食物水提取物对羟自由基的清除作用，为抗氧化剂的筛选提供了新的分析方法。 （三）合成了一种近红外荧光探针——三碳花菁染料（Cy.7.Cl），利用其生物背景干扰少的优点，建立了一种流动注射-荧光法测定生物样品中痕量双氧水的分析方法。