论文部分内容阅读
目的:本试验以大鼠高脂模型为基础,研究蔓越橘提取物(Cranberry extract, CE)降脂抗氧化作用,并着重研究CE对胆固醇代谢相关受体的调节作用。方法:选取50只体重为120-130gSD雄性大鼠作为试验动物,随机分为五组,每组各10只,分别为空白组、模型组及CE低、中、高剂量三个试验组。其中空白组饲喂基础饲料,模型组及试验组均饲喂高脂饲料,且同时以0、0、0.01、0.1、1g/kg-bw/d剂量的CE进行灌胃,饲养8周后进行如下试验。(1)心脏采血并分离血清,运用BS-190全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活力水平变化,对试验数据进行分析。(2)脱颈处死各组大鼠,取肝脏,分析脏器系数,并制作肝组织切片,进行显微观察、描述组织结构并进行显微摄影。(3)制取肝匀浆,严格按照试剂盒要求进行超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)的检测并进行分析。(4)提取肝脏中蛋白,运用蛋白免疫印迹法(Western Blot),分析CE对PPARa、 LPL, CYP7A1、LXRa蛋白表达量的影响。结果:1、饲喂高脂饲料的模型组及CE试验组大鼠体重明显大于空白组(P<0.05)。脏器系数结果表明,相对模型组而言,各试验组肝脏系数均有所下降,但CE中剂量组下降明显(P<0.05);肉眼观察肝脏发现,模型组大鼠肝脏肿大,颜色呈土黄色,边缘钝,质地易脆,CE处理的大鼠肝脏肿胀程度变轻,颜色随着剂量增大由土黄色逐渐变为暗红色,呈现剂量效应依赖关系;病理学结果显示,饲喂高脂饲料的各组存在不同程度的脂肪变性,但CE处理的试验组大鼠脂肪变性较模型组有改善,并呈现剂量关系且CE高脂肪变性程度最轻微。2、血清生化指标测定结果显示,CE各组内血清TC、TG和LDL-C有显著降低(P<0.05),其中低剂量组HDL-C增加显著(P<0.05),而高剂量组变化不明显。另外CE各组中血清ALT、AST和ALP浓度均有明显下降(P<0.05),并呈现剂量效应关系。3、肝匀浆试验结果表明,CE能提高肝脏抗氧化能力,检测发现,试验组中SOD、GSH-PX、T-AOC均有提高,而MDA有显著下降(P<0.05),而其对CAT无明显作用。4、蛋白水平结果显示,低剂量组对高脂大鼠肝内PPARa表现为上调作用,且上升明显(P<0.05);中、高剂量的CE试验组肝脏内LPL的表达量呈上升的趋势;相对模型组而言,试验组中、高剂量组大鼠肝脏中CYP7A1值均有增加且变化显著(P<0.01);CE对高脂大鼠中LXRa在中、高剂量组表现上调作用,且LXRa变化明显(P<0.01)。结论:本试验通过对血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT、AST、ALP,及肝脏中SOD、MDA、GSH-PX、T-AOC、CAT检测,得出CE能减少肝脏内脂质的蓄积,并可以减轻氧化损伤的程度;并研究肝脏中PPARa、LPL、CYP7A1、LX Ra受体,得出CE可以减少高脂大鼠肝脏胆固醇蓄积,并维持胆固醇内稳态。