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目的:研究葛的生物学特性,评价不同产地葛的遗传关系及其药材质量差异,为葛的规范化种植和野生资源的开发利用提供科学依据。 方法:实地观测葛的生物学特性;以葛根化学成分葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮、多糖和醇溶性浸出物的含量为主要评价指标,对葛根的化学成分动态积累规律进行研究,对不同产地葛药材的质量进行评价;采用RAPD分子标记法分析不同产地葛的遗传关系;采用高效液相色谱法建立葛根药材的化学成分指纹图谱。 结果: 第一章:葛根的生物学特性研究。 1、对全国葛根的种质资源进行了调查、收集和整理,明确了葛根种质资源的分布及不同居群点的生态信息,建立了葛根种质资源圃。 2、对一年内不同月份和不同年限葛根的化学成分动态积累规律进行研究,结果表明多年生8月份的葛根中各化学成分含量最高,为葛根采收期的确立提供参考依据。 3、对不同产地葛根中各化学成分的含量进行对比,结果表明不同产地葛根质量差异明显,为葛根质量评价提供参考依据。 第二章:对不同产地葛根进行RAPD分子标记。 1、建立了适合于野葛RAPD分析的扩增体系。 2、通过PCR扩增共从80条引物中筛选出8条,得到扩增条带45条,其中多态性条带37条,多态率达到82.22%。 第三章:葛根药材指纹图谱的研究。 1、采用HPLC法建立葛根药材指纹图谱,确立了8个共有峰,以葛根素为参照峰。色谱条件为:PhenomenexHydroODSC18(5μm,4.6mm×250mm)色谱分析柱;流动相:乙腈-0.2%磷酸水溶液;梯度洗脱:0~8min乙腈(11%~14%);8~18min乙腈(14%);18~30min乙腈(14%~25%);30~35min乙腈(25%~30%);35~40min乙腈(30%);40~45min乙腈(30%~11%);45~55min乙腈(11%);检测波长:250nm,柱温:25℃,流速:0.8ml·min-1。 2、运用上述方法对28批葛根进行分析,结果显示:除粉葛以外,其他所有药材的相似度均在0.9以上,说明指纹图谱控制的物质群在药材中得以体现。 结论:建立了葛根种质资源圃,明确了葛的生育周期及其药材的化学成分动态积累规律和质量上的差异,为保护野葛资源、合理开发利用及其药材质量的综合评价提供科学依据。