NeuroD6是神经源性分化蛋白NeuroD蛋白亚家族中的一种转录因子,属于bHLH分化因子中的一员,它可以和E-BOX结合并启动下游基因的转录。NeuroD家族在胚胎期脑组织发育及成体动物的神经细胞的存活与再生过程中起着重要的调控作用。但是其具体调控机理尚不清楚。本课题运用生物信息学方法,结合相关生物软件经详细的比较分析得出人和小鼠的NeuroD家族成员中NeuroD6基因序列和蛋白序列的同源性最高。由此可推论NeuroD6可能在神经细胞发育中起到更为重要的作用。通过实验,首先我们确定了小鼠内源性NeuroD6蛋白的亚细胞定位。后经Pull-down分析,确定了 NeuroD6的一个相互作用蛋白ATW。为了探究ATW蛋白是否会对NeuroD6的亚细胞定位产生影响,我们构建了 NeuroD6的真核表达载体与ATW-RNAi载体。并将这两个载体分别或共转染Hela细胞。最后分别提取胞质和胞核蛋白并做Western blot以检测NeuroD6蛋白的分布。最后结果显示ATW被抑制后,NeuroD6的入核效率明显的降低,但是没有完全被抑制。我们分析,一方面可能由于细胞内还有残余的ATW蛋白的影响;另一方面,可能有其他同工的蛋白参与NeuroD6进入细胞核的过程。