大黄鱼是我国四大海产之一,具有极高的经济价值;大面积的集约化养殖大黄鱼随之也带来了严重的病害。“内脏白点病”是近些年出现在网箱养殖大黄鱼中最常见的病害之一,大黄鱼感染后内脏出现白色结节,且患病大黄鱼死亡率极高,已造成严重的经济损失。目前,变形假单胞菌是导致大黄鱼“内脏白点病”的病原菌的观点得到广泛认可。变形假单胞菌广泛分布于海水中,是典型的条件致病菌,变形假单胞菌不仅能够感染大黄鱼,对其他多种水产经济鱼类都有一定感染性。近年来,变形假单胞菌感染的发病率显著增加,给我国水产养殖业带来了巨大经济损失。本实验室前期从患有“内脏白点病”的大黄鱼内脏中分离、鉴定了一株具有较强毒性的变形假单胞菌NZBD9菌株,并利用dual RNA-seq分析发现lexA可能参与变形假单胞菌的毒力调控机制。LexA首先在大肠杆菌中被鉴定为SOS反应中的一个关键转录调控因子,参与DNA损伤修复过程的调控,且在几乎所有细菌中都存在lexA基因,但关于LexA参与细菌毒力调控的相关研究目前仍罕见报道。因此,本研究围绕变形假单胞菌这一重要水产致病菌,对lexA基因在毒力调控中的作用与分子机制进行初步的研究。本研究主要包括以下内容:（1）采用温度、pH、丝裂霉素-C、H2O2以及重金属等胁迫处理变形假单胞菌NZBD9,并利用q RT-PCR检测lexA基因的表达情况,结果表明:lexA在4℃时表达水平显著下调,在44℃时表达水平显著上调;lexA在pH=4或者9时,表达水平显著下调;lexA在不同浓度的H2O2处理下,表达量均呈现下调趋势;在丝裂霉素-C处理下,lexA表达水平显著上调;在Cu2+、Pb2+胁迫处理后,lexA的表达水平显著下调。以上结果表明这些胁迫处理在转录水平上对lexA的表达具有显著影响,证明变形假单胞菌lexA在DNA损伤诱导因子之外的多种环境胁迫的应答中扮演重要角色。值得注意的是,在本研究中,丝裂霉素C作为一种DNA损伤诱导剂,促进了lexA的转录表达,这可能是LexA通过自我切割与降解的方式参与DNA损伤修复之后的一种反馈调节机制。（2）采用同源重组技术,构建lexA缺失突变菌株,并对突变株的粘附、生物被膜形成、运动、溶血、以及生长能力进行检测,分析lexA缺失突变对变形假单胞菌毒力表型的影响。结果显示,△lexA菌株的粘附能力和生物被膜形成能力显著下降;而△lexA菌株的运动、溶血以及生长能力与野生株无显著差异。以上结果表明,lexA参与了变形假单胞菌粘附和生物被膜形成的毒力调控。（3）为了进一步了解lexA对变形假单胞菌毒力的调控机制,我们对△lexA菌株进行转录组测序,获得了诸多毒力相关的差异表达基因,并发现包括鞭毛组装、细菌趋化以及生物被膜形成的多个通路在lexA缺失后受到显著影响。同时,我们围绕LexA开展了染色质免疫共沉淀测序（Chi P-seq）,进而将Chi P-seq与转录组测序的结果进行关联分析,得到了lrg A、ton B等重要潜在靶基因,并对潜在靶基因进行q RT-PCR验证。最后,我们通过免疫共沉淀质谱联用技术（Co IP-MS）找到了可能与LexA具有潜在相互作用的Rec A、Htp G、Fur等蛋白。以上结果表明,LexA可能与Rec A、Htp G、Fur等蛋白一起,通过调控下游基因表达,进而影响变形假单胞菌的毒力。