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第一章:流式细胞仪分选外周血CD3+CD4+T淋巴细胞方法的建立 目的:建立一种准确快速分离外周血CD3+CD4+T淋巴细胞，对细胞活性干扰少的分选方法。 方法:首先用Percoll连续密度梯度离心法制备外周血单个核细胞，采用流式细胞仪分选CD3+CD4+T淋巴细胞。分选后的细胞通过细胞存活率、细胞纯度鉴定和形态观察对分选方法进行评价。 结果:Percoll连续密度梯度离心法能很好的制备外周血单个核细胞，分选前CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(51.9±9.6)％，分选后CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(95.9±0.8)％，差异有显著性(P＜0.01)。分选后的细胞存活率为(95.8±1.2)％，细胞的形态保持完整。 结论:采用流式细胞仪分选的CD3+CD4+T淋巴细胞纯度和存活率高，对形态影响小并可在无菌条件下进行，分选的细胞可继续开展其他功能的研究。 第二章:人肠道组织中CD3+CD4+T淋巴细胞分选方法的建立 目的:建立一种准确且对细胞活性干扰少的分离人肠道组织中CD3+CD4+T淋巴细胞的分选方法。 方法:首先用消化酶分解人肠道组织，40μm细胞滤器过滤获得细胞悬液。Percoll连续密度梯度离心法分离细胞悬液收集单个核细胞，然后通过流式细胞仪分选单个核细胞中的CD3+CD4+T淋巴细胞。分选后的细胞采用细胞存活率、细胞纯度和形态观察对分选方法进行评价。 结果:消化酶能够很好的分解人肠道组织获得细胞悬液，Percoll连续密度梯度离心法收集的单个核细胞中CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(43.9±7.3)％，流式细胞仪分选后CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(96.9±1.2)％，差异具有显著性(P＜0.01)。分选后的细胞存活率为(97.8±1.6)％，细胞的形态保持完整。 结论:Percoll连续密度梯度离心法联合流式细胞仪分选法(FACS)收集人肠道组织的CD3+CD4+T淋巴细胞纯度高，且对细胞形态和存活率影响小并可在无菌条件下进行，分选的细胞可继续用于其他功能的研究。 第三章:整合素α4β7在肠道表达的意义 目的:通过对外周血和肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率的检测，从分子水平为肠道作为人免疫缺陷病毒感染主要部位提供依据。 方法:采用流式细胞仪对外周血和肠道组织中CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达情况进行分析，并对数据进行统计学处理。 结果:外周血CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率为(30.2±5.1)％，肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率为(45.2±6.2)％，差异有显著性(P＜0.01)。 结论:整合素α4β7受体使CD3+CD4+T淋巴细胞向肠相关淋巴组织归巢，肠道组织CD3+CD4+T淋巴细胞整合素α4β7表达率高于外周血。肠道CD3+CD4+T淋巴细胞高表达整合素α4β7使肠道作为人免疫缺陷病毒感染的主要部位成为可能。