目的:创建大鼠慢性心力衰竭模型并使其服用益气活血中药及赖诺普利片,以TGF-β1为影响因子,探究其作用靶点及机理,阐明益气活血中药干预慢性心衰大鼠心肌纤维化的作用机制,可以帮助临床治疗慢性心衰竭并为其提供有效的理论依据及参考。材料与方法:1.建立慢性心力衰竭大鼠模型:选用SPF级、12周龄,体重在230~260g范围内的健康雄性SD大鼠100只,通过对左冠状动脉前降支进行结扎,配合游泳、节食等方法后,行心电图、心脏彩超检查,示ST-T段抬高、左室射血分数(EF)≤45%(EF)或CI≤180ml/min/kg,该结果为衡量慢性心衰大鼠造模成功与否的标准。2.实验动物分组:采用随机数表法抽取10只大鼠设为假手术组(正常组),将造模成功的大鼠分为:模型组、中药组、西药组,为保证各组样本数量均衡,每组分10只。3.实验用药:用药包括益气活血中药(黄芪、红花、人参、益母草、丹参、葶苈子、茯苓),所有药品均来自于辽宁中医药大学附属医院中药制剂中心。赖诺普利片的生产公司为上海信谊万象药业股份有限公司,规格每片10mg,国药准字HI0960265。4.实验给药剂量:在本实验中,不对假手术组、模型组处理任何药物,取而代之的是等容积(3ml)蒸馏水进行灌胃处理,每日1次;治疗组(中药组、西药组)则按照人鼠剂量等量换算并提供益气活血中药9.2g生药/Kg;赖诺普利片1.5mg生药/Kg,每日1次,连续28天。5.试验检测技术:本实验用于测量每组慢性心衰大鼠心肌组织中TGF-β1的mRNA及蛋白表达变化情况的手段是蛋白免疫荧光技术(Western blot)、定量荧光PCR技术,并记录平均灰度值;测量BNP的浓度的方法是通过ELISA法;镜下观察心肌细胞形态学改变。结果:1.假手术组与其余三组比较,假手术组中BNP浓度最低,p<0.05,组间差异显著,证明心衰发生时血浆中BNP的含量增加。治疗组与模型组比较,治疗组中BNP浓度减少,p<0.01,组间差异显著,证明通过药物干预,可以能减少心肌组织内BNP的产生。中药组与西药组相比,血浆中BNP含量相当,P>0.05,组间差异无统计学意义。2.假手术组与其余三组比较,假手术组TGF-β1mRNA的含量最低,P<0.01,组间差异显著,提示慢性心衰发生时心肌组织内TGF-β1mRNA的表达水平呈增高趋势;模型组与中药组、西药组相比,模型组中TGF-β1 mRNA的含量最高,P<0.05,存在组间差异,证明中、西药物能够干预TGF-β1 mRNA的表达,治疗慢性心衰均有显著疗效;中药组与西药组相比,TGF-β1mRNA的含量相当,P>0.05,组间差异无统计学意义,证明中、西药物治疗慢性心衰均有效,且疗效相当。3.假手术组与其余三组比较,假手术组中TGF-β1蛋白含量最低,P<0.01,组间差异显著,说明慢性心力衰竭发生时,心肌组织内TGF-β1蛋白表达水平呈增高趋势,心肌纤维化程度加重;模型组与治疗组相比,模型组中TGF-β1蛋白含量最高,P<0.05,存在组间差异,说明中、西药物能够干预TGF-β1蛋白的表达,对治疗慢性心衰均有显著疗效;中药组与西药组相比,TGF-β1蛋白含量相当,P>0.05,可忽略不计,以上对比可以得出慢性心衰竭的治疗在中、西药物的作用下均有效果,并且疗效差别很小。4.镜下心肌细胞形态的变化:假手术组大鼠心肌细胞排列紧密整齐,细胞核形状、大小相当,横纹清晰,肌原纤维分布有序,无折断及缺损;模型组大鼠心肌细胞错综复杂,细胞核形状大小不规整,横纹消失,心肌纤维排列混乱,存在断裂、缺失;治疗组大鼠呈现出心肌细胞排列整齐,细胞核大小相似,肌原纤维排列有秩序,可见横纹,存在折断或缺损。由此可见,益气活血复方能抑制心肌纤维化,防止心室重构,在治疗慢性心衰上有疗效,且疗效相当。结论:1.通过比较各组中BNP的浓度,证明慢性心衰发生时,BNP浓度升高。2.在模型组中,TGF-β1的蛋白及mRNA表达水平均高于其余各组,证明慢性心衰发生时TGF-β1高度表达,参与心肌纤维化,促进慢性心衰的发生发展。3.在中药组和西药组中,与模型组相比较,TGF-β1的蛋白及mRNA表达水平低,说明中、西药物可以抑制心肌纤维化,延缓慢性心衰的发生发展。4.中药组、西药组之间比较,TGF-β1的蛋白及mRNA表达水平无明显差异,证明中、西药物均可干预心肌纤维化,治疗慢性心衰的疗效相当,值得推广应用。5.通过各组间比较,镜下心肌细胞形态有所改变,证明心衰发生时心肌细胞形态被破坏。