【摘 要】
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目的:构建弓形虫RH株速殖子cDNA文库并用慢性感染的小鼠血清对其进行免疫学筛选,以寻找有效的疫苗候选分子和早期诊断弓形虫病的试剂。方法:收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取
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目的:构建弓形虫RH株速殖子cDNA文库并用慢性感染的小鼠血清对其进行免疫学筛选,以寻找有效的疫苗候选分子和早期诊断弓形虫病的试剂。方法:收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,逆转录生成cDNA,PCR合成cDNA双链。经过纯化、sfi A B酶切、过柱除去小片段后,与λTriplEx2噬菌体载体两臂连接包装后形成弓形虫RH株速殖子cDNA文库。收集成囊株(Pruaniaud株)慢性感染的小鼠血清,经滤膜吸附法去除血清中的大肠杆菌抗体,用以筛选弓形虫RH株速殖子cDNA文库。对3次复筛得到的阳性克隆进行插入片段的核苷酸序列测定,结果送GenBank进行同源性分析。根据序列测定结果,选取其中一个具有完整开放阅读框架的基因进行分析。结果:初始文库的容量为7.8×106个重组子,经感染XLl-Blue菌扩增后,文库的滴度达1010pfu/ml。任意挑取克隆经自身环化后提取质粒,酶切后片段大小范围为400-1200bp,重组率90%以上。用抗血清初筛了约7.2×104个重组的噬菌体,得到38个阳性克隆,对其中15个阳性克隆经过三次复筛,得到4个持续阳性反应克隆。通过对四个克隆进行测序并经同源性分析发现,WT1克隆基因为弓形虫P30基因;WT4克隆基为弓形虫N-乙酰磷酸丙糖转移酶基因;WT9克隆基因与现在已知的基因无同源性:WT12克隆基因与一未知的弓形虫基因有很高的同源性,且具有一个513bp大小的完整的开放阅读框架,通过对其蛋白质结构和功能预测,它可能是一个跨膜信号蛋白。结论:本试验成功地构建了弓形虫RH株速殖子cDNA文库,筛选所得到的阳性克隆有望成为早期诊断抗原或保护性疫苗分子,值得进一步研究。
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目的:观察黄连素对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用并探讨其机制。 方法:将30只Wistars大鼠随机分为糖尿病模型组(D)10只,尾静脉注射链尿佐菌素(STZ)25mg/kg,注射后两周,挑选糖耐
现在很多人喜欢旅游。由于酒店的拖鞋质地轻薄且不干净,一些人会自己带拖鞋,可拖鞋不方便携带,我想发明一种便携、轻便、可反复使用的拖鞋。我把这个想法告诉了老师,在她的指导下,我制作了旅行拖鞋,它由泡沫鞋底和按扣构成。 我先找来一塊泡沫板,根据自己平时穿的鞋码数在上面画好鞋底的形状,再剪下一对鞋底,然后在鞋底上画上前后相向的“U”,并用刀片依照“U”形划开,注意“U”形离鞋底边的距离只有一两厘米,最后
发明背景: 电梯事故时有发生,严重危害了人们的生命安全,我们想设计多电梯运行平稳性监控系统,对电梯事故提前预警。当电梯出现安全隐患时,它会通过声音和指示灯发出警报,并通过手机App将相关信息告知用户,避免事故发生。 设计思路: 通过认真阅读各地近年来电梯安全事故报告,结合实地调查走访,我们发现电梯工作年限过久、维护保障不到位、電梯带病运行等是引发电梯事故的重要原因,很多电梯安全事故在发生前是
航空母舰上的舰载机在降落时极易失败而摔机,往往机毁人亡。仅2003年这1年印度空军就有52架飞机坠毁,平均每周1架。难道没有办法避免摔机事故发生吗?我想我可以找到一种有效的办法。 我请教科技辅导老师,老师说,有的汽车配有自动泊车辅助系统,可以帮助驾驶员把车停放到位,有人称它为助驾机器人。 对哦,我们何不用机器人来辅助舰载机降落呢?刚好我在机器人兴趣班上了解到应用超声波传感器,机器人可以准确地做
卡纸、彩笔、剪刀、碟子、水杯 1.在卡紙上画上花朵,花瓣至少7瓣。花瓣越多,花朵绽放的效果越好。 2.将花朵剪下来,用彩笔给花朵涂上漂亮的颜色。 3.将纸花的花瓣按顺序折起来,一定要按顺序折叠,然后将花瓣压紧。 4.往碟子里倒入适量的水。 5.将折叠好的纸花放入水中,注意只能将纸花放在水面上,切忌浸入水中。 6.观察水中的花朵,你会发现花瓣慢慢张开,最后花朵完全盛开,漂浮在水面上。
灭蚊产品一般有蚊香、驱蚊液、电蚊片,灭苍蝇的产品有苍蝇贴,它们灭蚊蝇的效果都不太好,我想发明超声波灭蚊蝇器。 超声波灭蚊蝇器外观像电视遥控器,里面装有一个小型的超声波发射器,使用充电电池,外壳上有“开关”“灭蚊子”“灭苍蝇”3个按钮,能根据蚊子和苍蝇害怕的波段发射相应的超声波,瞬间将蚊子或苍蝇击落。 它的使用方法很简单,首先按住“开關”按钮开机,然后站到需要灭蚊或灭蝇的场所中央位置按住“灭蚊子
我的弟弟小敏个子不高,大大的眼睛,长长的睫毛,圆圆的脸蛋,显得挺机灵,可是他听不到声音,也不会说话。爸爸妈妈带他去许多医院看过,医生都为难地摇摇头,表示无能为力,为此,妈妈不知偷偷地哭过多少次。 我比弟弟大4岁,常和他一起玩,每玩一种新游戏,都耐心地教他。他虽然听不到声音,也不会说话,但脑筋灵活,学几遍就能学会。而教他认词就比较难,有些名词如“电视机”,我只要一边说一边指向家里的电视机,他就能明
平板电脑已经走入课堂,而同学们常常随意摆放这种电子设备,导致它从课桌上滑落,造成不必要的損失。市面上的电子支架大多是为大屏手机而设计的,不太适用于平板电脑,于是我专门制作了可固定在学习桌上的电子设备支架。 这种电子设备支架主要部件由3D打印而成,底部装有橡胶吸盘,支架可折叠,能安全放置平板电脑或其他电子设备,避免平板电脑等电子设备从桌上滑落的现象发生。 创新点: 1.制作简单,组装方便。
本研究共包括四个部分的工作。第一部分明确了离体照射后的DNA损伤可以准确反映整体照射的DNA损伤情况,可以用离体人血照射,进行剂量—效应曲线的拟合。第二部分在前面工作
一年有四季,有的人喜欢春季,有的人喜欢夏季,有的人喜欢秋季,而有的人喜欢冬季。有时人们会为哪个季节好而争论不休,瞧,广场上又有人为此在吵架!身穿红大衣的阿姨说:“冬天好,冬天会下雪,我们能堆雪人、打雪仗……很好玩。”旁边的大叔说:“冬天太冷了,夏天才好呢,能听蝉鸣、捉虫子……”一个头发花白的爷爷说:“秋天好,不冷不热”……我听完他们的话,决定发明四季转化软件。 说干就干,我将自己关在实验室里埋头