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目的： C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow—derived dendriticcell，BMDC)体外用HBeAg刺激，探讨HBeAg对LPS诱导小鼠骨髓源性树突状细胞成熟和功能的影响。 方法： 1.分离C57BL/6小鼠骨髓细胞，在rmGM-CSF和rmIL-4联合作用下诱导分化为未成熟树突状细胞，分别以倒置显微镜、透射电镜观察DC形态，经CD11c磁珠分选纯化DC，流式细胞术检测纯度，行台盼蓝染色检测磁珠分选前后细胞活性。 2.体外诱导的树突状细胞分为空白对照组，LPS(1μg/mL)刺激组，HBeAg+LPS(HBeAg5μg/ml+LPS1μg/mL)刺激组。按照实验要求对各组细胞进行不同干预。 3.收集各组细胞，用流式检测技术观察DC表型变化。 4.收集各组细胞，采用混合淋巴反应检测细胞促淋巴细胞增殖能力。 5.收集各组细胞上清液，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中IL-12的分泌水平。为探讨细胞IL-12分泌的可能调节机制，另外设置SB203580+LPS组为阳性对照，即在DC培养体系中加入50μ mol/L SB20358024h后，再以LPS(1μg/mL)刺激后检测上清中IL-12水平。 6.以SB203580组为阳性对照，收集各组细胞提取蛋白，采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各组p38磷酸化水平。 结果： 1.C57BL/6小鼠骨髓细胞体外经rmGM-CSF和rmIL-4联合作用下诱导分化的细胞的形态与树突状细胞相符;采用CD11c磁珠分选后，流式检测细胞纯度较高，且分选前后细胞活性无明显差异。 2.LPS刺激可活化未成熟DC，引起细胞表面MHC-Ⅱ，CD86表达升高，与空白对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）;若在细胞培养体系中预先加入HBeAg，再予LPS刺激，则细胞表面MHC-Ⅱ与CD86的表达均明显低于LPS组（P＜0.01）。 3.MLR结果显示LPS刺激成熟的DC显示更强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。HBeAg处理过的DC再经LPS刺激，其促异体淋巴细胞增殖能力提高有限。当DC/T比值为1∶5和1∶10时，HBeAg+LPS组细胞刺激淋巴细胞增殖的能力明显弱于LPS组(P＜0.01)，而当DC/T比值为1∶20时，此两组无显著差异（P＞0.05）。 4.LPS刺激组DC分泌IL-12p70明显升高，与余三组差异均有统计学意义(均P＜0.01)。经HBeAg预处理再以同等剂量LPS刺激后IL-12p70分泌高于空白组（P＜0.01），但仍明显低于LPS组（P＜0.01）。SB203580组的IL-12p70分泌量最低，与空白对照组的差异无统计学意义（P＞0.05），与余两组相比差异均有统计学意义（均P＜0.01）。 5.LPS刺激DC可引起p38磷酸化水平升高，并呈时间依赖性;HBeAg或SB203580预处理细胞，再予LPS刺激，p-p38表达较单纯LPS刺激组明显下降，差异有统计学意义（均P＜0.01）。 结论： 1.HBeAg对LPS引起的树突状细胞的成熟有一定的抑制作用，包括从细胞表型、刺激淋巴细胞增殖以及细胞因子分泌三个方面。 2.HBeAg可能通过抑制p38MAPK信号通路下调LPS诱导的树突状细胞IL-12的产生。