本文研究工作分为两部分： 第一部分：目的：探讨JAK2 V617F与骨髓增殖综合症(MPD)的关系。 研究方法： 对503例骨髓增殖综合症按WHO标准进行回顾性诊断。应用Allele-specificPCR检测JAK2 V617F突变情况，对JAK2 V617F(+)者用PCR-RFLP检测突变状态，根据PCR联合测序分析结果按突变位点T/G比值分析JAK2 V617F突变负荷。比较JAK2 V617F不同负荷与患者临床及实验室特征的关系。对JAK2V617F(-)者，PCR联合测序检测MPL W515L突变。 结果： 按照WHO诊断标准，503例CMPD患者分别诊断为真性红细胞增多症(PV)116例，原发性血小板增多症(ET)153例，原发性骨髓纤维化(PMF)142例，慢性粒细胞白血病(CML)88例，骨髓增殖性疾病不能分类(MPD-U)4例。 JAK2 V617F总检出率68.5％(345/503)，其中PV94％(109/116)，ET79％(122/153)，PMF78％(111/142)，MPD-U75％(3/4)，CML未发现存在突变。345例JAK2 V617F(+)患者5例为纯合子突变(PV4例，ET1例)。V617F突变以低负荷为主(71.5％)。突变负荷以PV组最大，ET其次，PMF负荷最小(p=0.003)。PV患者血红蛋白水平与V617F突变负荷呈明显正相关，负荷越高血红蛋白水平越高(p=0.033，r=0.203)。ET患者骨髓巨核细胞数与V617F突变负荷呈正相关，负荷越高骨髓巨核细胞数量越高(p=0.024，r=0.205)；另外，PMF高突变负荷组患者肝大发生率以及肝大程度均明显高于低负荷组(p值分别为0.003，0.001)，并且肝肿大程度与突变负荷呈明显正相关(p=0.001，r=0.315)。经统计分析，JAK2V617F突变、JAK2 V617F突变负荷与MPD患者年龄、性别、血栓形成、高血压、脾大程度、白细胞、血小板计数、骨髓增生程度、骨髓纤维化程度及骨髓原始细胞比例均无明显相关性。 结论： 1.MPD患者存在JAK2 V617F突变，在PV、ET、PMF、MPD-U中均能检测到。检出率PV>ET>MF>MPD-U，CML中未发现此突变。 2.JAK2 V617F突变状态显示98％为杂合子突变，纯合子突变绝大部分见于PV。 3.PV、ET、PMF三组疾病突变负荷不同，PV负荷最大，ET次之，PMF最小。 4.JAK2 V617F突变负荷与PV患者血红蛋白水平、ET骨髓巨核细胞数量以及PMF肝肿大程度呈明显正相关。 第二部分：目的：探讨JAK2 V617F与慢性嗜酸粒细胞白血病(CEL)/高嗜酸粒细胞综合症(HES)分子生物学及临床特征关系。 研究方法： 回顾性分析20例CEL/HES，筑巢式RT-PCR检测FIP1L1-PDGFRA融合基因；Allele-specific PCR联合测序分析检测JAK2 V617F，PCR-RFLP检测JAK2V617F突变状态；PCR法检测TCRγ重排。比较F/P+CEL与HES临床实验室特征。对1例F/P+CEL给予伊马替尼治疗，评价伊马替尼临床及分子生物学疗效。 结果： 20例患者男：女为19：1，中位年龄33岁(20～57岁)。12例FIP1L1-PDGFRA检测结果阳性，测序证实FIP1L1断裂位点位于intron 10～12，PDGFRA断裂位点位于exon12。F/P+CEL患者以呼吸道症状起病者多见，易合并循环系统损害及神经系统症状。F/P+CEL患者脾大发生率明显高于HES(92.5％vs 42.5％，p=0.031)，发生贫血及骨髓纤维化的比例亦高于后者。外周血嗜酸细胞绝对值、白细胞计数、血小板、骨髓嗜酸细胞比例、骨髓原始细胞比例二组之间均无差异。嗜酸细胞形态学异常更多见于CEL患者，主要表现为嗜酸性颗粒减少，嗜碱颗粒增多及胞浆空泡等。1例HES患者发现存在JAK2 V617F，突变状态分析显示为杂合子突变。6例检出TCR7基因重排，其中CEL4例，HES 2例。1例经小剂量伊马替尼(100mg/d)治疗的F/P+CEL患者在治疗后70天获得完全血液学缓解，120天获得分子生物学缓解。 结论： 1.嗜酸粒细胞增多男性好发，以年轻人为主； 2.F/P+CEL患者主要表现为循环系统、呼吸道及消化道症状，易发生贫血和血小板减少。常规检查对F/P+CEL与HES鉴别意义不大，骨髓涂片形态学检查对F/P+CEL诊断有一定帮助； 3. 部分HES患者存在JAK2 V617F突变，进一步研究其在HES发病中的作用有助于今后此类患者的诊断及开展新的靶向药物治疗。 4.部分F/P+CEL同时存在TCRγ重排，二者在HES发病中的关系需进一步研究。 5.对于F/P+CEL，小剂量酪氨酸激酶抑制剂疗效显著，应用RT-PCR方法检测FIP1L1-PDGFRA融合基因快速、敏感、有效。不仅有助于诊断，同时可以监测疗效，指导治疗。