甜叶菊为菊科甜菊属多年生草本植物,其叶片富含多种甜菊醇糖苷,是食品及药品工业的甜味原料,在国际上被誉为“世界第三健康糖源”。本研究以甜叶菊不定芽为材料,对甜叶菊进行无菌快繁体系的建立;在此基础上探讨秋水仙素与氟乐灵对甜叶菊多倍体诱导的影响,对变异植株进行倍性鉴定,并对获得的多倍体植株进行甜菊糖苷含量的测定;探讨LED光质对组培苗增殖、生理和生化指标的影响,以得到影响甜叶菊离体培养的最佳LED光质。以期为提高甜叶菊的繁殖系数,选育甜菊糖苷含量高,性状优良的新品种,实行工厂化规模生产,满足市场需求提供重要科学依据。主要研究结果如下:1)以甜叶菊带腋芽茎段为外植体建立了再生体系,最佳消毒方式为70%的酒精消毒30 s,0.2%的次氯酸钠处理10 min;增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;壮苗与生根培养基为 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA。2)研究了秋水仙素和氟乐灵对甜叶菊不定芽同源四倍体诱导的影响。0.1%秋水仙素浸泡处理不定芽24 h,诱导率为23.1%;采用混培法诱导时,秋水仙素浓度为100 mg/L,处理时间为21 d,诱导率达到27.5%。30 mg/L氟乐灵溶液浸泡不定芽48 h,诱导效果最好,诱导率可达到33.2%。3)通过形态学观察、细胞学鉴定、染色体计数对变异植株进行倍性鉴定,四倍体植株表现为叶片明显变大,部分叶片皱缩;植株叶片气孔长度、宽度分别为二倍体叶片气孔的160.78%、154.15%;相同视野(目镜10倍、物镜40倍)下四倍体叶片气孔个数仅为二倍体的48.17%。甜叶菊二倍体对照植株染色体条数为2n=2X=22,四倍体植株染色体条数为2n=4X=44。4)对多倍体植株进行糖苷含量的测定,“农大一号”品系四倍体植株叶片糖苷总含量比二倍体提高了 4.16%,RA苷含量提高了 6.98%,RM苷含量提高了 0.51%。“农大三号”品系四倍体植株叶片糖苷总含量比二倍体提高了 2.88%,RA苷含量提高了9.38%,RM苷含量提高了 0.66%。5)LED红光:蓝光=3:1时,适宜不定芽增殖与地上部分的生长以及叶绿素含量的积累,增殖倍数为13.9,较为粗壮;植株高度为82.57 mm;地上鲜重、干重均达到最大值1.95 g、0.16 g;叶绿素总含量达到最大值1.98 mg/g。单色光质与组合光质处理下根的数量均有所增加,单一红光处理下,根的数量达到最大值16.4,但LED光质抑制根的伸长和根部鲜重与干重。当红光:蓝光=1:2时,整株鲜重、干重均为最高,分别为 3.68 g、0.29 g。