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本研究旨在探讨癌基因Bmi-1在鼻咽癌侵袭、转移过程中的作用及相关的分子机制。
研究方法:
用免疫组化及免疫荧光的方法检测Bmi-1、E-Cadherin、a-Catenin、Fibronectin、Vimentin、Snail在组织或细胞中的表达以及亚细胞定位状态；RT-PCR以及Real Time RT-PCR检测mRNA表达情况；荧光素酶报告系统检测E-Cadherin启动子的活性；染色质免疫共沉淀(ChiP)法检测Bmi-1结合p16及PTEN启动子的能力。用transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力；划痕实验检测细胞的迁移能力；三维培养观察细胞在模拟体内的环境下的生长方式以及形态学差异；软琼脂克隆形成实验检测细胞的锚定非依赖性生长能力；裸鼠成瘤实验比较细胞在体内形成肿瘤的能力。
结论:
1)Bmi-1诱导鼻咽上皮细胞发生上皮-间叶细胞转变(EMT)，促进鼻咽癌侵袭、转移；
2)Bmi-1诱导EMT的主要分子机制是直接作用于PTEN启动子，抑制PTEN转录，其方式同调控p16一样，以通过多梳基因抑制复合体共同结合的方式完成调控过程；
3)Bmi-1抑制PTEN，激活PI(3)K/AKT信号通路，使Snail发生细胞亚定位的改变，并延长Snail蛋白半衰期，抑制E-Cadherin转录，从而发生EMT，并促进鼻咽癌的侵袭转移。