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目的:以线粒体能量代谢为切入点,探讨化瘀祛痰方对动脉粥样硬化家兔肝脏脂质沉积的影响及机制,丰富“痰瘀论治”AS的科学内涵。材料与方法:90只SPF级健康雄性新西兰白兔,适应性喂养2周后,随机分为正常对照组、模型组、化瘀祛痰方高剂量组、化瘀祛痰方中剂量组、化瘀祛痰方低剂量组、辛伐他汀组,每组15只。正常对照组喂饲普通饲料同时耳缘静脉注射生理盐水,其他组喂饲高脂饲料同时耳缘静脉注射牛血清白蛋白生理盐水溶液造动脉粥样硬化模型,各组均自由摄食,饮水不限。8周后,各治疗组给予相应药物进行干预治疗,给药剂量按照人和动物体表面积折算系数进行换算。正常对照组与模型组给予相同体积的生理盐水,灌胃给药,每天1次,连续给药4周后取材。全自动生物化学分析仪检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;HE染色、油红O染色,观察肝组织形态学改变;比色法检测家兔肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性;Blue-Native-Page法检测线粒体呼吸链酶复合物含量;ELISA法检测肝脏ATP含量;PCR array法检测肝脏线粒体能量代谢相关基因m RNA变化情况;Western Blot法检测线粒体能量代谢相关蛋白。结果:1.化瘀祛痰方对AS家兔血脂水平的影响与正常对照组相比,模型组家兔血清中TC、TG、LDL-C显著升高(P<0.01),HDL-C显著降低(P<0.01);与模型组相比,各治疗组家兔血清中TC、TG、LDL-C显著降低(P<0.01),HDL-C显著升高(P<0.01),其中以化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组治疗效果较佳(P<0.01或P<0.05)。2.化瘀祛痰方对AS家兔肝脏组织形态学变化及肝脏脂质沉积的影响与正常对照组相比,模型组家兔肝脏组织细胞肿胀明显、大量脂肪空泡清晰可见,胞浆内有明显的橘红色脂滴蓄积;与模型组相比,各给药组肝脏脂肪空泡样变性及脂质沉积均有不同程度改变。其中以化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组改善肝脏脂质沉积效果最佳。因此后续实验仅选择治疗效果较佳的化瘀祛痰方高剂量组进行下一步的研究。3.化瘀祛痰方对AS家兔肝脏线粒体能量代谢的影响线粒体呼吸链酶复合物活性实验结果显示:与正常对照组相比,模型组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性降低(P<0.05),与模型组比较,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性升高(P<0.05)。Blue-Native-Page结果显示:与正常对照组相比,模型组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ含量降低(P<0.05),与模型组比较,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组肝脏线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ含量升高(P<0.05)。ELISA结果显示:与正常对照组相比,模型组家兔肝脏内ATP生成减少(P<0.01);与模型组相比,化瘀祛痰方高剂量组与辛伐他汀组家兔肝脏组织ATP生成增加(P<0.05或P<0.01)。4.化瘀祛痰方对线粒体能量代谢相关基因m RNA及蛋白的影响PCR array结果显示:与正常对照组相比,模型组73个基因m RNA发生改变(上调67个,下调6个);与模型组相比,化瘀祛痰方组80个基因m RNA发生改变(10个上调,70个下调)。在模型组上调的67个基因m RNA中,有46个基因m RNA在治疗后表达趋势发生逆转。Western Blot结果显示:与正常对照组相比,模型组NDUFS1、NDUFS2、UQCRC1、UQCRC2、ATP5C1、COX4I1、COX6B1蛋白表达含量下降(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,化瘀祛痰方组NDUFS1、NDUFS2、UQCRC1、UQCRC2、ATP5C1、COX4I1、COX6B1蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01)。结论:1.化瘀祛痰方能够降低AS家兔血脂水平改善其肝脏脂质沉积。2.化瘀祛痰方能够通过增加肝脏线粒体呼吸链酶复合物活性及含量表达进而促进ATP生成量。3.化瘀祛痰方可能通过调节线粒体能量代谢相关基因m RNA与蛋白的表达,以及改善AS家兔肝脏脂质沉积,进而防治动脉粥样硬化。