内皮细胞(endothelial ceil)的活化与血管的许多生理、病理过程相关，参与炎症反应、血管重构、血栓形成、血管增生等。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)对内皮细胞有显著的激活作用，引起血管通透性升高，白细胞募集。 肌球蛋白轻链激酶是一种依赖于Ca2+/CaM的底物专一性磷酸化酶，专一地磷酸化肌球蛋白轻链，从而调节细胞骨架。最近有研究发现，MLCK参与了牛肺动脉内皮细胞中TNFα/NF-κB通路的调节，但其作用机制还不清楚。本文利用MLCK敲除的小鼠肺微血管内皮细胞(MLCIC-/-mouse pulmonary microvascular endothelial cell，MLCK-/-MPMEC)及人脐静脉内皮细胞研究TMLCK的作用，并提出了一条MLCK调节TNFα/NF-κB的新的可能机制。我们研究发现： 1. TNFα/NF-κB的活化被MLCK抑制剂抑制。Western Blot分析结果表明，ML-7抑制了TNFα诱导的IκBα降解。免疫荧光结果显示：ML-7抑制了NF-κB(p65)的转核，相应地，受NF-κB调控的黏附分子ICAM-1的表达降低，白细胞的黏附减少。 2.TNFα/NF-κB的活化在所必须的。小鼠肺部微血管内皮细胞(MLCK-/-MPMEC)，进一步证实了MLCK对于内皮细胞中TNFα激活的NF-κB的调节作用。以TNFα刺激细胞，NF-κB(p65)的转核被抑制，小鼠白细胞的黏附作用也明显受到抑制。 3.抑制MLCK就能够抑制TNFR1向细胞质膜的转移。为了寻找MLCK作用于TNFα/NF-κB的调节靶点，我们研究了TNFα刺激后TNFR1在细胞内的分布，结果显示，TNFR1向细胞质膜的转移在ML-7处理的HUVEC和MLCK-/-MPMEC中均受到抑制。 结论：我们的研究证实了内皮细胞中MLCK在TNFα/NFκB中的作用，并提出：调节TNFR1从胞内向细胞质膜的转移可能是其作用的一个新的机制。