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目的:通过观察水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质中TGF-β1,Col3,α-SMA,FN,磷酸化Smad2及磷酸化Smad3表达的干预情况,从而进一步深入研究其作用机制。方法:选用60只健康雄性SD大鼠,大鼠体重为180±20g。适应性饲养大鼠1周后,把它们随机分为假手术组（SOR组）10只,造模组50只。造模组共有5组:模型组（UUO组）10只、水蛭素低剂量治疗组（UUO+LI组）10只、水蛭素中剂量治疗组（UUO+MI组）10只、水蛭素高剂量治疗组（UUO+HI组）10只、盐酸贝那普利片（洛汀新）治疗组（UUO+LOT组）10只。全部造模组大鼠进行左侧输尿管结扎手术,而假手术组只需游离大鼠左侧输尿管,但不进行结扎手术。手术后所有大鼠均需注射20万单位青霉素,进行抗感染治疗3天。术后第1天开始,UUO+LI组皮下注射水蛭素10IU·kg-1·d-1,UUO+MI组皮下注射水蛭素20IU·kg-1·d-1,UUO+HI组皮下注射水蛭素40IU·kg-1·d-1,UUO+LOT组在手术后第1天起给予盐酸贝那普利片（洛汀新）1mg·kg-1·d-1灌胃,假手术组和模型组予皮下注射等量生理盐水,需进行持续注射14天,实验过程中可普通饲料喂养,大鼠可以自由进水。各组大鼠将于手术后第14天被全部处死,经下腔腹主动脉收集5ml-7ml血液标本,进行下一步血清Scr,BUN的检测,同时切除大鼠左侧肾组织,进行HE染色,PCR、Western Blot技术检测肾组织内TGF-β1/Smad信号通路相关指标的表达。结果:1.生化指标:通过检测各组大鼠术后血肌酐结果可得:与SOR组大鼠相比,UUO组、UUO+LI组、UUO+LOT组大鼠术后血肌酐水平均明显升高（P<0.05）;其余干预组大鼠血肌酐水平出现升高趋势,但不具有显著性（P>0.05）。与UUO组大鼠相比,UUO+LI组有下降趋势,但不具有显著性（P>0.05）,其余各干预组大鼠血肌酐水平显著降低（P<0.01）。尿素氮结果可得:与SOR组相比,UUO组大鼠尿素氮水平均明显升高（P<0.05）,UUO+LOT组大鼠BUN水平均显著升高（P<0.01）,其余干预组有升高趋势,但不具有显著性。与UUO组相比,UUO+MI组大鼠尿素氮有明显下降（P<0.05）,UUO+LI组大鼠和UUO+HI组大鼠的尿素氮出现下降趋势,但不具有显著性（P>0.05）。2.病理观察:1)肉眼观察:SOR组大鼠肾脏形态、大小正常,颜色呈暗红;UUO组大鼠梗阻侧肾脏体积显著增大,淡暗色呈色,肾脏组织表面呈凹凸感,包膜出现囊性增厚,肾积水多,皮质部出现变薄的情况,同时伴随着肾盂扩张的产生。各干预组大鼠梗阻侧肾脏肉眼表现与UUO组相似,但均有不同程度减轻。2)HE染色:SOR组大鼠肾脏无明显病理改变,UUO组可见肾小管上皮细胞变性及坏死,肾小管扩张或萎缩,肾间质炎性细胞浸润与纤维组织增生等改变。与UUO组相比,药物干预组大鼠肾脏病理改变均有不同程度减轻。3.RT-PCR检测:1)与SOR组相比,UUO+LOT组TGF-β1基因的相对表达量明显上升（P<0.05）,UUO组与其余药物干预组TGF-β1的相对表达量显著提高（P<0.01）。与UUO组相比,UUO+LI组和UUO+MI组TGF-β1的相对表达量明显降低（P<0.05）。2)与SOR组相比,UUO+HI组α-SMA的相对表达量显著上升（P<0.01）,UUO组与其余药物干预组α-SMA的相对表达量明显提高（P<0.05）。与UUO组相比,所有药物干预组均对α-SMA的相对表达量有明显降低作用（P<0.05）。3)与SOR组相比,UUO+LOT组FN的相对表达量明显上升（P<0.05）,UUO组与其余药物干预组FN的相对表达量显著提高（P<0.01）。与UUO组相比,UUO+LI组及UUO+MI组FN的相对表达量明显降低（P<0.05）。4)与SOR组相比,UUO组及UUO+LI组Col3的相对表达量显著上升（P<0.01）,UUO+MI组表达量明显上升（P<0.05）。与UUO组相比,UUO+LI组可以明显降低表达量（P<0.05）,UUO+MI组、UUO+HI组和UUO+LOT组可以显著降低Col3的相对表达量（P<0.01）。4.Western Blot检测:1)与SOR组相比,UUO组TGF-β1表达显著升高（P<0.01）,UUO+MI组表达明显升高（P<0.05）,其余各组中TGF-β1蛋白有升高趋势,但无显著性（P>0.05）。与UUO组相比,UUO+LI组TGF-β1蛋白表达明显降低（P<0.05）,UUO+HI组和UUO+LOT组表达显著降低（P<0.01）。2)与SOR组相比,UUO组、UUO+LI组、UUO+MI组α-SMA蛋白相对表达量显著升高（P<0.01）,UUO+LOT组α-SMA蛋白相对表达量明显升高（P<0.05）。与UUO组相比,UUO+LI组α-SMA蛋白相对表达量明显降低（P<0.05）,其余各治疗组α-SMA蛋白表达下降明显,具有显著性统计学差异（P<0.01）。3)与SOR组相比,UUO组及UUO+HI组Col3蛋白的表达量显著上升（P<0.01）,UUO+LI组和UUO+LOT组蛋白的相对表达量明显上升（P<0.05）。与UUO组相比,UUO+LI组蛋白表达明显下降（P<0.05）,UUO+MI组和UUO+LOT组蛋白的相对表达量显著降低（P<0.01）。4)与SOR组相比,UUO组磷酸化Smad2（p-smad2）蛋白表达显著上升（P<0.01）,UUO+LI组、UUO+MI和UUO+LOT组蛋白表达量显著上升（P<0.01）,UUO+HI组蛋白表达量有明显上升（P<0.05）。与UUO组相比,所有干预组的p-smad2蛋白表达量均有显著下降（P<0.01）。5)与SOR组相比,UUO组与各药物干预组磷酸化Smad3（p-smad3）蛋白表达显著上升（P<0.01）。与UUO组相比,UUO+LI组、UUO+LOT组蛋白的相对表达量明显下降（P<0.05）,UUO+MI组及UUO+HI组的p-smad3蛋白相对表达量显著降低（P<0.01）。6)与SOR组相比,UUO组及UUO+LI组FN蛋白的相对表达量显著升高（P<0.01）,UUO+HI组、UUO+LOT组蛋白表达量明显升高（P<0.05）。与UUO组相比,所有药物干预组FN蛋白的相对表达量均具有显著降低（P<0.01）。结论:1.水蛭素能够降低UUO大鼠血Scr及BUN水平,改善肾间质损伤,从而延缓肾间质纤维化。2.水蛭素UUO+HI组、UUO+MI组与UUO+LI组均能下调UUO模型大鼠肾间质中的相关指标基因和蛋白的表达。其中UUO+MI组效果更为显著。3.对同一蛋白和基因的有效性差异与最佳药物剂量有关。