乌司他丁对尿源性SIRS猪的治疗作用及对肾组织NF-κB表达的影响

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目的:观察乌司他丁注射液对尿源性SIRS猪的治疗效果并探讨乌司他丁对尿源性SIRS猪肾组织核因子(NF-κB)表达的影响。方法:健康家猪48头随机分为假手术对照组、SIRS模型组和乌司他丁治疗组3组,后两组又分为术后4h、6h、12h和24h4个时间点亚组。应用生化分析仪行肾功能测定(Cr、β2-MG、BUN)。采用Wester blot法检测肾组织中NF-κB的活性,采用SP法检测肾组织NF-κB蛋白的表达,应用RT-PCR法检测肾组织中NF-κBp65mRNA的表达,通过透射电镜观察肾组织的形态结构变化。结果:SIRS组和对照组12小时、24小时肌酐比较,有统计学意义(P<0.05),SIRS组与对照组6小时、12小时、24小时Bun、β2‐MG比较,有统计学意义(P<0.01)。随造模时间的延长,SIRS组动物血清Cr、Bun、β2‐MG升高,Cr于术后24小时达到(122.00±11.87) μmol/L, Bun于术后24小时达到10.05±0.65mmol/L, β2‐MG于术后12小时达最大值4.14±0.38mg/L。乌司他丁组血清Cr、Bun在24小时时间点,β2‐MG于12小时及24小时比SIRS组降低,差异有统计学意义.对照组动物手术后Cr、Bun、β2‐MG略有上升,但和术前相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3组动物术前、0小时Cr、Bun、β2‐MG比较,无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测肾组织中NF-κB p65mRNA的表达:对照组与各组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。乌司他丁治疗组较模型组的NF-κB p65mRNA的表达在术后12h显著降低(P<0.01);SIRS组肾组织NF-κB p65mRNA表达显著高于Sham组(P<0.01),24h到达最大值。Western blot检测蛋白表达:SIRS模型组猪肾组织NF-κB蛋白的表达显著高于假手术组(P<0.01),于24h到达最大值;乌司他丁治疗组较模型组的蛋白的表达在术后12h显著降低(P<0.01)。免疫组织化学检测蛋白表达:模型组猪肾组织的表达显著高于假手术组(P<0.01),于24h到达最大值;乌司他丁治疗组较模型组的蛋白的表达在术后12h显著降低(P<0.01)。电镜观察对照组肾组织结构无明显改变;SIRS组随时间延长,肾小球足突细胞融合,肾小球内皮细胞和系膜细胞明显增生并有水肿,线粒体嵴减少,结构排列紊乱、空泡形成,有断裂或缺失,甚至崩解;UTI组肾组织的病理损害明显减轻,肾小球瘀血程度较轻。结论:乌司他丁可能通过抑制NF-κB的合成与释放,减轻肾组织病理损害,改善肾功能,而达到治疗尿源性SIRS的作用。
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