广西巴马小型猪IL-17基因的序列分析及IL-17、IL-10基因和PRRS病毒E基因在真核表达质粒的构建

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猪白细胞介素-17(IL-17)是猪体内重要的细胞因子,本研究从ConA刺激的巴马小型猪的外周血淋巴细胞,22h后提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出猪IL-17,将其克隆到PMD18-T载体上,进行序列分析。结果显示,克隆的IL-17与GenBank上登录的猪IL-17基因序列同源性为99.4%,在核苷酸序列与推导的氨基酸水平上,与奶牛、人、家鼠的同源性分别为85.5%、82.5%、73.4%和82.5%、73.4%、63.6%。对细胞因子IL-17基因的比较分析,表明了该基因在进化过程中呈现种属间相对保守性。 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病自发现以来给世界各国养猪业造成了巨大的经济损失。本研究扩增、克隆了IL-17、从实验室保存的质粒中扩增出白细胞介素10(IL-10)及扩增克隆了PRRSV的E基因,构建出三个真核重组表达质粒:单独表达PRRSV的E基因的pIRESneo-E质粒、共同表达IL-10与E基因的pIRESneo-E-IL-10质粒、共同表达IL-17与E基因的pIRESneo-E-IL-17质粒,通过PCR及酶切鉴定表明,成功构建了上述三个真核表达质粒。
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