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亚单位疫苗具有广泛的应用。其中基于蛋白为载体的半合成疫苗,面临着结构复杂、蛋白自身引起响应、增加免疫负担等问题。iNKT细胞是一类特殊的免疫T细胞,具有NK细胞和T细胞的功能。与传统T细胞识别蛋白质或多肽不同,iNKT细胞识别的是类似于MHC分子的CD1d呈递的糖脂类抗原。值得指出的是:无需CD4+辅助T细胞的存在,iNKT细胞被激活后可以对非T细胞依赖性抗原产生免疫应答,帮助B细胞实现IgM到IgG的抗体类型转换,克服机体对小分子抗原的免疫耐受。我们设想将iNKT细胞激动剂引入合成疫苗,可简化疫苗结构且方便制备,同时能够有效引发针对非多肽小分子抗原的免疫反应。本论文分为两个部分:第一部分基于iNKT细胞激动剂发展针对成瘾小分子尼古丁的化学合成疫苗;第二部分基于iNKT细胞激动剂研究靶向致癌物黄曲霉毒素的化学合成疫苗。各章主要内容如下:第一章,介绍了化学合成疫苗的历史与现状,对尼古丁疫苗和黄曲霉毒素疫苗的发展进行了简要概述,同时对iNKT细胞激动剂作为佐剂在合成疫苗中的应用进行了总结。第二章,我们研究了 iNKT细胞激动剂αGalCer佐剂和尼古丁抗原之间的共价连接是否有利于增强免疫反应。首先,我们将尼古丁抗原与无免疫活性的脂质体载体βGalCer共价偶联,并分别与αGalCer和Pam3CSK4(常用TLR激动剂)、弗氏佐剂制备成脂质体的形式免疫小鼠。小鼠免疫结果表明:以αGalCer为佐剂的免疫活性优于Pam3CSK4、弗氏佐剂。基于αGalCer非共价的优异免疫表现,然后,我们将αGalCer和尼古丁共价连接,合成了尼古丁疫苗Nic-αGalCer。免疫结果表明:Nic-αGalCer呈现浓度依赖关系,同时表现与非共价类似的优异免疫活性。基于上述结果,iNKT细胞激动剂αGalCer引入至尼古丁疫苗中,并以非共价混合的简便方式即可引起强的免疫反应,无需佐剂与抗原的共价连接。第三章,由于αGalCer等量引发Th1和Th2细胞因子的释放,为了进一步优化尼古丁脂质体疫苗,我们将产生Th1(IFN-γ)和Th2(IL-4)型细胞因子的iNKT激动剂引入尼古丁疫苗。我们设想将不同类型的iNKT细胞激动剂引入至尼古丁疫苗中,可以更有效地引发抗尼古丁的免疫响应。我们以Th1型的激动剂α-C-GalCer、C34和Th2型的激动剂C20:0、C10:0为外加佐剂,分别和尼古丁抗原载体分子Nic-βGalCer非共价组装,制备成脂质体的形式免疫小鼠。抗体滴度及动物行为测试结果表明:αGalCer、Th1、Th2型激动剂引发的免疫响应无显著性差异。通过细胞因子评价发现,Th1型和Th2型iNKT细胞激动剂以脂质体形式免疫产生的细胞因子均偏向于Th1型。基于上述结果,不同类型iNKT细胞激动剂为佐剂可以引发抗尼古丁抗体,同时脂质体制剂可增强细胞因子的释放并导致Th1/Th2平衡偏向Th1。第四章,我们将以上的脂质体疫苗模型用于构建结构确定、简便且有效的黄曲霉毒素疫苗。本文将iNKT细胞激动剂αGalCer和黄曲霉毒素B1通过共价和非共价的两种方式研究免疫活性影响。我们将黄曲霉毒素B1肟化,然后再和经过硒酯活化的αGalCer共价连接得到化合物AFB1-αGalCer。同时合成了无免疫活性的AFB1-βGalCer为载体分子,与αGalCer非共价混合。将合成的疫苗分子制备成脂质体的形式免疫小鼠。免疫结果表明以非共价形式构建的疫苗产生的抗体滴度及识别不同类型的黄曲霉毒素的能力均高于共价形式。将iNKT细胞激动剂αGalCer引入至黄曲霉毒素疫苗中,并以非共价混合的简便方式即可引起强的免疫反应。基于上述结果,以iNKT细胞激动剂为佐剂,无需引入多肽即可引发非T细胞依赖抗原免疫响应,为构建简便、有效的疫苗提供了新的策略。