食品中黄曲霉毒素及伏马毒素检测方法的研究

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针对牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1(AFT M1)检测的净化过程中易出现堵塞免疫亲和柱的现象,本研究对其提取方法进行了改进。实验中采用乙腈与水体系对牛奶与奶粉中的AFT M1进行提取,得到澄清的上清液,可根据自身重力通过免疫亲和柱。同时,大体积流动池的使用,将检测灵敏度提高了近3倍。同位素稀释-液相色谱(LC)-串联质谱(MS/MS)法的建立,保证了奶粉中AFTM1检测的准确性。结果表明改进后的方法灵敏度高、准确度高,可满足GB2761-2011中对乳与乳制品样品最低限含量黄曲霉毒素M1的检测。实验中比较了黄曲霉毒素检测的几种衍生方法,并解决了TFA衍生法中AFT B2a和AFT M2较难分离的问题。采用超高压液相色谱-大体积流动池荧光法检测克服了AFT B1和AFT G1直接检测灵敏度低的现象,避免了柱前衍生步骤及柱后衍生所导致的峰扩散现象。结果表明,该方法具有较高的灵敏度、准确度和回收率。同位素稀释-LC/MS/MS法同时检测食品中的四种黄曲霉毒素的建立,更为有效的校正了前处理过程及离子化过程中造成的目标物损失,避免了空白基质配置标准的繁琐步骤。该方法的建立使得检测更加方便,结果更为准确。在花生酱样品检测中,发现多个样品中同时含有6种黄曲霉毒素,说明微生物同样也能代谢AFTM1和AFTM2。实验还比较了3种伏马毒素(FB)的4种柱前衍生法,选择邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生作为检测中的衍生方法,并对其色谱条件进行了改进。采用甲酸-甲酸铵缓冲体系作为水相流动相,采取梯度洗脱对3种伏马毒素进行检测,解决了原有方法因磷酸盐缓冲体系与甲醇会出现盐析出现象而无法进行梯度洗脱的现象,提高了检测的效率及FB2、FB3的检测灵敏度。
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