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本论文以课题组前期从鲶鱼体表黏液中分离纯化的抗菌肽“CF-14”（RIVELTLPRVSVRL-NH2）为研究对象。利用生物信息学对CF-14氨基酸序列基本性质进行预测,通过合成鱼源抗菌肽CF-14,对其基本性质进行表征,以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为靶标菌,深入探究CF-14的抑菌机理。最后,成功制备PLA/CF-14纳米纤维膜,并对纺丝膜性质及抑菌效果进行表征和验证。主要研究结果如下:1.利用生物信息学对鱼源抗菌肽CF-14氨基酸序列分析得出,CF-14在抗菌肽数据库中相似度最高的仅为40%,且具有阳离子性、两亲性及热稳定性;结构分析显示CF-14中部及两端呈现无规则卷曲,其余部分为延伸链,且延伸链和无规则卷曲方式各占50%;跨膜性预测CF-14不会在膜上形成跨膜离子通道,也不会插入细菌细胞膜使其破坏,预测其可能不是膜作用型肽;毒性及溶血性分析显示CF-14没有毒性且不会使红细胞发生溶血。另外,CF-14氨基酸序列抑菌性研究发现,增强电荷性和酰胺化修饰对抗菌肽抑菌活性影响较大,肽链中部的脯氨酸及两端的氨基酸对抗菌肽抑菌性至关重要。2.根据CF-14氨基酸序列对其进行合成,并通过质谱检测对合成肽的准确性进行验证。体外抑菌试验及相关理化性质研究得出,CF-14对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有较强抑制作用,对腐败希瓦氏菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为62.5μg/mL和31.3μg/mL;溶血性和毒性实验表明,CF-14对绵羊红细胞无明显溶血现象,且在1 mg/mL浓度下仍然不会对293T细胞的存活率产生影响;通过检测抗菌肽在不同环境下抑菌性的变化,得出CF-14在高温和强酸性环境下活性会遭到一定程度破坏且对酶的敏感性较强。3.以腐败希瓦氏菌和大肠杆菌为靶标菌,对CF-14抑菌机理进行探究。核酸泄露检测发现,CF-14可以使细菌核酸发生泄露;扫描电镜发现,开始阶段细胞膜表面出现轻微的穿孔现象,但细胞整体保持完整形态,12 h后CF-14处理的细胞出现明显的破裂崩塌;圆二色谱检测,当CF-14处于模拟细胞膜环境时,其α-螺旋结构明显增加;激光共聚焦显微镜观察证实了CF-14能够进入细菌细胞并在细胞质中累积,暗示了抗菌肽可能存在胞内作用靶点;核酸电泳结果表明,高浓度的抗菌肽可以与细菌DNA结合;分子对接实验表明,CF-14竞争性地结合在DnaK的常规底物结合位点,从而抑制了细菌细胞内未成熟的肽链与DnaK结合,并最终影响细菌。4.通过静电纺丝技术成功制备PLA/CF-14纳米纤维膜。加入CF-14后,PLA纺丝纤维直径减小且更加均匀,纤维方向随机相互交叉成网络结构;红外光谱检测发现,共纺纤维中同时出现CF-14和PLA的特征峰,且两者为物理性结合;X射线衍射分析发现,CF-14的加入使PLA纤维结晶度减小,分子链的成核能力下降,最终导致聚合物的结晶能力变弱;拉伸测试得出,CF-14加入会使纳米纤维膜抵抗拉伸的能力增强,延伸能力下降,韧性变差;另外,PLA/CF-14纳米纤维膜仍然具有很好的抑菌活性,可以明显抑制腐败希瓦氏菌的生长。