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背景与目的:乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一,在发达国家,其发病率位于女性恶性肿瘤之首,病死率仅次于肺癌,居第2位。近年来,对恶性肿瘤处于亚临床阶段的循环微小转移灶的检测日益受到国内外学者的重视,而外周血的微转移检测以其简便无创,方便随访等特点而备受关注。然而至今仍未发现单个的微转移标志物在特异性和敏感性上皆有令人满意的结果。文献报道联合检测多个标志物可有效提高微转移的检出率,但联合检测的指标尚缺乏统一的标准。本研究利用RT-PCR通过联合检测乳腺癌患者外周血中的CK19mRNA、SBEMmRNA、PIPmRNA,探讨三者作为外周血微转移标志物的可行性,以及联合检测三者对提高微转移检出率的作用。方法:采用RT-PCR检测50例乳腺癌患者、20例结直肠癌患者、21例乳腺良性病患者、20例健康志愿者外周血中的CK19mRNA、SBEMmRNA、PIPmRNA。分析它们与乳腺癌的相关性及与临床病理特征的关系,并比较联合检测与单个指标阳性率的差别。结果:(1)在20例健康志愿者及21例乳腺良性病患者外周静脉血中均没有发现CK19mRNA、SBEMmRNA或PIPmRNA的阳性表达。在20例结直肠患者标本中有4例(20.0%)发现CK19mRNA阳性。而在50例乳腺癌患者标本中检测出CK19mRNA阳性18例(36.0%),与健康志愿者组及乳腺良性病患者组比较差别有显著性(P <0. 01),与结直肠患者组比较无显著差别(P >0. 05);检测出SBEMmRNA阳性14例(28.0%),PIPmRNA阳性9例(18.0%),分别与结直肠患者组、乳腺良性疾病患者组及健康志愿者组比较均有显著性差异(P<0. 05)。(2)CK19mRNA、SBEMmRNA或PIPmRNA的阳性率与年龄、月经情况、病理类型、分化程度、大小、ER、PR、C-erbB-2等比较,差别均无显著意义(P>0.05)。CK19mRNA、SBEMmRNA的阳性率与临床分期相关,III+IV期的阳性率分别为69.2%、61.5%,与I期(20.0%、20.0%)II期(25.0%、15.6%)比较,差别有统计意义(P<0.05);而PIPmRNA各期的阳性率差别无统计意义。(3) SBEMmRNA、PIPmRNA、和CK19mRNA阳性率一致性检验Kappa值分别为0.165、-0.095、-0.032(P>0.05),可认为两两比较的一致性较差;联合检测则分别将阳性率由18.0%、36.0%、28.0%提高到38%(19/50)、56%(24/50)、48%(28/50),与单一指标比较,差别有显著意义(P<0.01),联合三个基因,则可将阳性率提高到62%(31/50),与任一单个指标或任2个指标比较,差别均有显著意义(P<0.01)。结论:(1) SBEM mRNA、PIP mRNA作为外周血乳腺癌微转移标志物具有较高的特异性,均可独立作为乳腺癌微转移标志物,而CK19mRNA可作为上皮来源肿瘤的标志物,但作为乳腺癌微转移标志物,其特异性尚待进一步探讨。(2)CK19mRNA、SBEM mRNA在乳腺癌患者中的表达与临床分期相关,III+IV期患者的阳性率均较I期、II期患者高;而PIPmRNA各期的阳性率差别无统计意义。(3)SBEMmRNA、PIPmRNA和CK19mRNA的阳性率与年龄、月经情况、病理类型、分化程度、大小、ER、PR、C-erbB-2等临床指标均未见明显相关性。(4)SBEMmRNA、PIPmRNA和CK19mRNA阳性率两两比较的一致性较差。(5)联合检测SBEMmRNA、PIPmRNA、和CK19mRNA,可将阳性率由18.0%、36.0%、28.0%提高到62%(31/50),高于任一单个指标或任2个指标的联合检测;联合检测可提高外周血微转移的阳性率。