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目的:本实验在针灸“治未病”理论指导下,探究电针百会、肾俞穴对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)样大鼠学习记忆和认知障碍的影响,并进一步研究其作用机制是否通过调控自噬相关通路PI3K/AKT/mTOR轴,诱导自噬发生,促进海马神经元内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)清除,减轻神经突触损伤,从而改善阿尔茨海默病(AD)样大鼠学习认知能力,为促进、推广针灸“治未病”防治AD提供科学的实验依据。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针组和假电针组,每组12只。除空白对照组外,其余各组予D-半乳糖120mg/kg/d连续腹腔注射7周以建立AD样病理模型。电针组、假电针组于每日腹腔注射后针刺“百会”、“肾俞”,并连接电针治疗仪,每次20min,其中电针组刺入穴位后通电,假电针组仅刺入皮肤且不通电。干预结束后,采用Morris水迷宫和开放旷场评估各组大鼠的学习认知能力,透射电镜观察海马区突触数密度,免疫组化观察海马区PHF-1表达水平,Western blot检测海马区自噬相关蛋白PI3K、AKT、P-AKT、mTOR表达水平。结果:1.预电针对各组大鼠行为学的影响在Morris水迷宫定位航行实验中,第1天各组大鼠逃避潜伏期对比差异均无统计学意义(P>0.05),但随着训练天数的增加其逃避潜伏期均有所降低。与空白对照组第2-5天同时间相比,模型组和假电针组大鼠逃避潜伏期显著较长(P<0.01);电针组第2天逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05)、第3天有统计学意义(P<0.05)、第4-5天有显著统计学意义(P<0.01)。与模型组第2-5天同时间比较,电针组逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),假电针组与其差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠第2-5天同时间逃避潜伏期显著缩短(P<0.01)。在Morris水迷宫空间探索实验中,与空白对照组相比,模型组和假电针组经过原平台象限时间较长,差异有显著统计学意义(P<0.01);电针组和其比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相对比,电针组大鼠经过原平台象限时间比率明显增加(P<0.01);假电针组与其差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠经过原平台象限的时间显著延长(P<0.01)。在旷场实验中,与空白对照组相比,模型组和假电针组大鼠运动距离,直立次数和中心区域运动时间有明显增加(P<0.01),差异有显著统计学意义(P<0.01);电针组和其比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相对比,电针组大鼠运动距离,直立次数和中心区域运动时间比率都有明显增加(P<0.01);假电针组与其差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠以上指标均有统计学意义(P<0.01)。2.预电针对各组大鼠海马突触数密度和突触形态的影响与空白对照组相比,模型组与假电针组大鼠海马区突触数密度明显较少(P<0.01);电针组和其比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,电针组大鼠海马区突触数密度明显较高(P<0.01);假电针组与其差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠突触数密度明显增高(P<0.01)。模型组大鼠海马区出现神经元突触结构融合、后膜致密物质稀疏,前后膜界限不清,完整突触数量减少的现象;电针组海马区病理形态学显示优于模型组,电针组大鼠海马区神经元突触结构恢复近正常水平。3.各组大鼠海马区PHF-1的表达与空白对照组相比,模型组与假电针组大鼠海马区PHF-1表达水平明显升高(P<0.01);电针组和其比较差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,电针组大鼠海马区PHF-1表达水平明显降低(P<0.01);假电针组与其差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠PHF-1阳性表达降低(P<0.01)。4.各组大鼠海马PI3K、AKT、P-AKT、mTOR表达比较与空白对照组相比,模型组与假电针组大鼠海马区PI3K、AKT、P-AKT、mTOR的表达水平均明显增多(P<0.01);电针组以上蛋白表达与其比较差异均无统计学意义(P>0.05),假电针组与其比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,电针组大鼠海马区PI3K、AKT、P-AKT、mTOR表达水平均明显降低(P<0.01);假电针组PI3K的表达与模型组差异有统计学意义(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05)。与假电针组相比,电针组大鼠自噬相关蛋白表达降低(P<0.01)。结论:1.预电针可以改善AD样病变模型大鼠的空间学习记忆能力和认知功能。2.预电针可以改善AD样病变模型大鼠海马区突触损伤程度,促使突触数密度增加,促进突触再生,说明预电针可能通过改善海马区突触的形态学结构,提升AD病理模型大鼠的学习与认知能力。3.预电针可以通过抑制AD样病变模型大鼠海马区NFTs的病理性沉积,减轻突触毒性,改善大鼠的学习认知功能。4.预电针可以下调AD样病变模型大鼠海马区自噬相关蛋白PI3K、AKT、P-AKT、mTOR的表达水平,诱导自噬的发生。说明预电针治疗能改善AD样大鼠的学习记忆和认知障碍,其机制可能是通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导自噬,促进NFTs清除,减轻神经突触损伤,进而改善学习记忆认知功能,从而达到防治AD的作用。