精液的保存是山羊人工授精技术的关键,精液的保存可以延长精子的存活时间,提高良种公畜的配种效能,进而为实现羊产业化奠定基础。目前,山羊精液的液态低温保存在生产应用中仍然是主要的保存方法。在精液的液态低温保存过程中,不同的稀释液配方、精浆含量及不同抗冷保护剂均会在很大程度上影响精液低温保存效果。本试验首先对5种稀释液配方进行内蒙古绒山羊精液低温保存效果的对比;然后以最佳配方为基础稀释液,比较了精液不同稀释方法(高倍稀释组(1:10)、低倍稀释组(1:2)和离心洗涤组(去精浆))、不同精浆含量(0、10%、20%、30%和40%)和不同换液方式(半换液或全换液)对精液低温保存的效果;最后在最佳配方的基础上,比较了不同抗冷保护剂(卵黄、大豆卵磷脂及脱脂奶粉)对精液低温保存效果的影响。所得结果如下:1.精液低温保存5 d后,“配方3”的低温保存效果最好,精子活率为48.96%,顶体完整率为51.70%,质膜完整率为40.11%,线粒体膜完整率为46.56%,均显著高于其他试验组(P<0.05)。因此,本试验将“配方3”作为后续试验的基础稀释液。“配方3”的主要成分如下:Tris 300mM,葡萄糖56mM,柠檬酸95mM,果糖 80.6mM,NaHC03 14.9mM,HEPES 25.4mM,ATP 15.7mM,青霉素 50IU/mL,链霉素 100mg/mL,卵黄 10%。2.精液低温保存5 d后,高倍稀释组的精子活率、运动速率及质膜完整率均显著高于低倍稀释组和离心洗涤组(P<0.05)。添加一定含量的精浆可显著提高山羊精液保存效果,而10～20%(v/v)是相对最适的精浆浓度范围;半换液组的精子活率显著高于全换液组和对照组(P<0.05)。3.精液低温保存5 d后,在稀释液中添加不同抗冷保护剂,卵黄组和大豆卵磷脂组的精子各项指标均显著高于脱脂奶粉组(P<0.05),而前两者间无明显差异(P>0.05),但大豆卵磷脂组的精子各项指标均略高于卵黄组,其精子活率为48.18%,直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)及平均路径速率(VAP)分别为68.33 um/s、92.30 um/s和85.06 um/s,顶体完整率为53.15%,质膜完整率为43.03%,线粒体膜完整率为50.09%,因此,大豆卵磷脂可以作为山羊精液低温保存稀释液中有效的抗冷保护剂。