微型锌指蛋白(mini zinc finger protein,MIF)含有锌指结构域,具有参与激素调节、影响细胞分化、影响花发育的功能。到目前为止,只有在拟南芥、番茄和非洲菊中的MIF被报道,MIF在草莓中的功能尚不明确。本研究从二倍体森林草莓(Fragaria vesca)中克隆出FvMIF2基因的编码区序列,通过亚细胞定位、转录激活以及对过量表达植株的表型分析等技术,揭示FvMIF2的基因功能和表达特性。主要结果如下:(1)利用PCR技术从二倍体森林草莓资源‘Ruegen’中克隆出FvMIF2基因,其编码区(coding sequence,CDS)序列碱基数为267bp,编码88个氨基酸。FvMIF2基因与栽培草莓(F.×ananassa)Fa MIF2基因的序列一致性为99.25%。利用NCBI分析,发现FvMIF2的结构域为‘ZH-HD＿dimer’。(2)构建了pRI101-FvMIF2-eGFP融合载体,将其导入拟南芥的原生质体中,进行亚细胞定位观察,结果显示FvMIF2定位于细胞核中。(3)利用qRT-PCR方法分析FvMIF2基因在草莓的不同器官中的特异性表达,发现其在红果中的相对表达量最高,在叶片中的相对表达量最低,尤其是新叶。(4)分别用茉莉酸甲酯、水杨酸和脱落酸3种激素以及4℃低温、37℃高温、Na Cl、甘露醇4种胁迫对栽培草莓基因型‘D-10’组培苗进行处理,分别在0 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h进行取样,利用qRT-PCR方法鉴定MIF2基因在不同处理和不同处理时间下的相对表达量,发现草莓MIF2响应激素处理和胁迫处理。(5)构建了pGBT9-FvMIF2融合载体,将其导入酵母菌中,进行转录激活试验,结果表明FvMIF2不具有转录自激活活性。(6)构建了pRI101-AN-FvMIF2过表达融合载体,通过农杆菌介导的遗传转化方法得到了2个‘D-10’的FvMIF2基因过表达株系。已经将两个转基因株系和非转基因对照植株驯化移栽成活并在日光温室培养,目前转基因植株已经开始出现差异表型,其叶片颜色加深且展开程度减小。