目的:　　 分析宫颈上皮内瘤样变(CIN)及宫颈癌中P16INK4Aa基因甲基化改变及其蛋白过表达情况,探讨P16INK4a基因甲基化及其蛋白过表达在宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌临床筛查和早期诊断中的意义。　　 方法:　　 选取150例宫颈组织作为研究对象,其中包括宫颈癌30例,宫颈上皮内瘤样变(CIN)90例(宫颈上皮内瘤样变Ⅰ级30例、宫颈上皮内瘤样变Ⅱ级30例、宫颈上皮内瘤样变Ⅲ级30例),正常宫颈组织30例(对照组)。分别采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法、高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)核酸扩增(PCR)荧光检测方法及免疫组织化学方法分别检测宫颈组织中P16INK4a基因甲基化改变情况、高危人乳头瘤病毒病毒感染情况及P16INK4a蛋白过表达情况,并进行比较分析。　　 结果:　　 1、P16INK4a蛋白在正常宫颈组、宫颈上皮内瘤样变组、宫颈癌组的过表达阳性率分别为0(0/30)、72.2％(65/90)、100％(30/30),三组间比较差异有统计学意义(P＜0.01)。宫颈上皮内瘤样变组中P16INK4a蛋白过表达阳性率明显低于宫颈癌组的过表达阳性率,且两组间比较差异有统计学意义(P=0.01)。在不同级别宫颈上皮内瘤样变中P161NK4a蛋白过表达阳性率分别为宫颈上皮内瘤样变Ⅰ级为36.6％(13/30)、宫颈上皮内瘤样变Ⅱ级为86.6％(26/30)、宫颈上皮内瘤样变Ⅲ级为93.3％(28/30),三组间比较差异有统计学意义(P＜0.01),即P16INK4a蛋白过表达阳性率随宫颈上皮内瘤样变级别的进展呈现逐渐递增的趋势。　　 2、30例正常宫颈组织中P16INK4a蛋白过表达全部为阴性,其中仅1例高危人乳头瘤病毒感染阳性,高危人乳头瘤病毒感染阳性率为3.3％;30例宫颈癌中P16INK4a蛋白过表达全部为阳性,其中28例高危人乳头瘤病毒感染阳性,高危人乳头瘤病毒感染阳性率为96.6％;宫颈上皮内瘤样变组中P16INK4a蛋白过表达阳性率和高危人乳头瘤病毒感染阳性率分别为72.2％(65/90)、75.5％(68/90),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),即P16INK4a蛋白过表达与高危人乳头瘤病毒感染有相关性。　　 3、P16INK4a基因在正常宫颈组、富颈上皮内瘤样变组及宫颈癌组的甲基化率分别为0(0/30)、6.6％(6/90)、26.6％(8/30),三组间比较差异有统计学意义(P=0.001)。不同级别宫颈上皮内瘤样变中,P16INK4a基因甲基化率分别为宫颈上皮内瘤样变Ⅰ级为0(0/30),宫颈上皮内瘤样变Ⅱ级为6.6％(2/30),宫颈上皮内瘤样变Ⅲ级为13.3％(4/30),即P16INK4a基因甲基化率随宫颈上皮内瘤样变级别的进展呈现逐渐递增的趋势,但三组间比较差异无显著性(P＞0.05)。　　 4、在宫颈上皮内瘤样变组及宫颈癌组中,所有发生P16INK4a基因甲基化的标本中P16INK4a蛋白均为过表达。P16INK4a基因甲基化与患者年龄、高危人乳头瘤病毒感染、宫颈上皮内瘤样变分级及宫颈癌分期无显著性关系(P＞0.05)。在宫颈上皮内瘤样变组中,高度宫颈上皮内瘤变的P16INK4a基因甲基化率(10.0％,6/60)高于低度宫颈上皮内瘤变的甲基化率(0％,0/30);在宫颈癌组中,宫颈癌Ⅱ期的P16INK4a基因甲基化率(33.3％3/9)高于宫颈癌Ⅰ期的甲基化率(23.8％,5/21),这说明P16INK4a基因的甲基化更易出现在宫颈病变的后期。　　 结论:　　 1、P16INK4a蛋白过表达的检测有助于区别正常宫颈组织和病变宫颈组织,可作为高级别宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌早期诊断的辅助指标,是宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌临床筛查、早期诊断及预测病情进展有价值的生物学标记物。　　 2、P16INK4a蛋白过表达和HR-HPV感染在宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌的发生发展过程中有协同作用,但P16INK4a蛋白过表达可能还存在HR-HPV之外的途径。P16INK4a蛋白过表达的检测可以协助宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌的病理诊断,提高宫颈上皮内瘤变及宫颈癌临床筛查和早期诊断的阳性率,降低假阴性率和假阳性率,减少不必要的手术操作。　　 3、P16INK4a基因甲基化是导致宫颈上皮内瘤样变及宫颈癌中P16INK4a蛋白过表达的重要机制,是宫颈癌发生发展过程中的早期事件,更容易出现在宫颈病变的后期。